1、目的：通過建立幼鼠內(nèi)毒素血癥肝損傷的動物模型并予以胰島素干預(yù)，研究胰島素對LPS誘導(dǎo)的幼鼠肝細胞釋放炎癥因子TNF-α和IL-6的影響，以及TNF-α和IL-6與NF-кB活化水平的關(guān)系，了解胰島素是否對內(nèi)毒素血癥所致的幼鼠肝損傷具有保護作用，并探討其作用機制。 方法：18日齡wistar幼鼠72只隨機分正常對照組(腹腔注射生理鹽水，n=8)、內(nèi)毒素血癥組(LPS組，腹腔注射LPS，n=32)和胰島素治療組(腹腔注射LPS+皮內(nèi)

2、注射胰島素，n=32)。LPS組和胰島素治療組LPS(5mg/kg)腹腔注射建立幼鼠內(nèi)毒素血癥模型，胰島素組同時給予胰島素(4IU/kg)皮內(nèi)注射；正常對照組腹腔注射等容量生理鹽水；LPS組和胰島素治療組根據(jù)建模后取標本時間的不同分2h、6h、12h、24h四個亞組，每個亞組8只，取肝臟制備石蠟切片和組織勻漿，普通光鏡、電鏡觀察各組肝細胞的病理改變情況，ELISA法測定肝組織勻漿TNF-α和IL-6的含量，快速血糖儀檢測幼鼠血糖濃度，賴

3、氏法檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的濃度，免疫組化法檢測肝組織NF-кB的活化水平，并對結(jié)果進行統(tǒng)計學分析。 結(jié)果： 1、組織學改變：光鏡下正常對照組肝細胞完整，結(jié)構(gòu)清晰，未見變性和壞死；LPS組肝組織損傷較明顯，肝細胞出現(xiàn)腫脹、空泡樣變性、匯管區(qū)有炎癥細胞浸潤，點片狀、大片狀壞死等，以6h最明顯，損傷等級評分與正常對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)，胰島素治療組肝組織損傷均輕于LPS組，6h損傷等級評分與L

4、PS組比較差異有統(tǒng)計學意義，p<0.05；電鏡下正常對照組內(nèi)質(zhì)網(wǎng)光滑，核膜完整，染色質(zhì)均勻分布于核內(nèi)；LPS組見胞漿疏松，線粒體腫脹，脊斷裂或消失，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張，核膜出現(xiàn)切跡，染色質(zhì)濃縮在核周邊，核仁碎裂，損害以6h組最為明顯；胰島素治療組各時點肝組織病理損害較LPS組輕。 2、血糖水平：胰島素治療組在2h和6h比正常對照組、LPS組低(p<0.05)，12h、24h各組之間差異均無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。 3、ALT

5、水平：2h各組之間差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)，LPS組6h、12h及24h均較正常對照組高(p<0.05)，胰島素治療組在6h、12h、24h均較LPS組降低(p<0.05)，但仍高于正常對照組。 4、肝細胞NF-кBp65蛋白的表達：LPS組核陽性細胞百分比較正常對照組高，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；胰島素治療組2h、6hNF-кBp65核陽性細胞百分比均明顯低于LPS組(p<0.05)。 5、肝組織TNF

6、-α、IL-6水平：在6h、12hLPS組高于正常對照組和胰島素治療組，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。 結(jié)論： 1.內(nèi)毒素血癥可引起肝損傷，導(dǎo)致肝細胞的破壞和肝功能的改變，說明肝臟是重癥感染的受累器官之一； 2.NF-кB的活化參與了內(nèi)毒素血癥肝損傷的發(fā)生，其機理可能是通過介導(dǎo)炎性介質(zhì)TNF-α和IL-6的合成使肝細胞發(fā)生炎性損傷； 3.胰島素對內(nèi)毒素血癥肝損傷有保護作用，其機理可能是通過降低NF-к