1、腎上腺素對(duì)內(nèi)毒素致雄性大鼠炎癥性肝損害的保護(hù)作用,柴敏、姚淵、徐蓉、謝珊珊,前言：,我國(guó)肝炎發(fā)病率不斷呈上升趨勢(shì)，臨床上對(duì)于治療肝炎的新藥物的研究也在不斷發(fā)展，腎上腺素(EPI)作對(duì)于肝炎癥性損傷的保護(hù)作用在臨床上尚處于研發(fā)階段，有很大的臨床應(yīng)用前景。本實(shí)驗(yàn)利用內(nèi)毒素脂多糖(LPS)會(huì)造成小鼠肝臟炎癥性損傷，比較是否給予EPI的不同組小鼠間的肝臟是否形成炎癥性損傷及其損傷程度，不同劑量的EPI對(duì)肝臟的保護(hù)作用是否存在劑量關(guān)系。,實(shí)驗(yàn)材料

2、與試劑,,實(shí)驗(yàn)對(duì)象：50只SPF級(jí)SD大鼠（由××實(shí)驗(yàn)室提供）,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物介紹：SD大鼠：由美國(guó)的Sprague & Dawley農(nóng)場(chǎng)的R.W.Dawley用雜合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠雜交后育成的一個(gè)白化封閉群大鼠。SPF級(jí)動(dòng)物：機(jī)體內(nèi)無(wú)特定的微生物和寄生蟲(chóng)存在的動(dòng)物，但非特定的微生物和寄生蟲(chóng)是容許存在的。一般指無(wú)傳染病的健康動(dòng)物，是目前國(guó)外使用最廣泛的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。篩選標(biāo)準(zhǔn)：體重為200g左右的雄

3、性大鼠,實(shí)驗(yàn)儀器與試劑,實(shí)驗(yàn)儀器與器材：Beckman全自動(dòng)生化分析儀CX-5型，靜脈注射器，剪刀，鑷子，自動(dòng)分析天平，小試管，移液管實(shí)驗(yàn)試劑：LPS（同一廠家生產(chǎn)，同批號(hào)）,EPI （同一廠家生產(chǎn)，同批號(hào)）,生理鹽水，標(biāo)記染料（苦味酸，品紅）,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理方式,,分組方法：分為5組，每組10只。采用完全隨機(jī)分組法。,1、編號(hào)：按動(dòng)物體重從小到大編號(hào)并標(biāo)記。2、取隨機(jī)數(shù)：給每個(gè)編號(hào)一個(gè)隨機(jī)數(shù)（查隨機(jī)數(shù)表或從計(jì)算機(jī)獲得）。

4、3、確定組別：根據(jù)受試對(duì)象獲得的隨機(jī)數(shù)決定受試對(duì)象的組別。,處理方式：,第一組：為空白對(duì)照組，先靜脈注射生理鹽水6mg/kg，再靜脈點(diǎn)滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時(shí)。第二組：為L(zhǎng)PS組，先靜脈注射LPS 6mg/kg，再靜脈點(diǎn)滴生理鹽水2.4ml/kg/h,持續(xù)6小時(shí)。第三組：為EPI低劑量組，先靜脈注射LPS 6mg/kg,再靜脈點(diǎn)滴腎上腺素0.12μg/kg/min,持續(xù)6小時(shí)。第四組：為EPI中劑量組，先靜脈

5、注射LPS 6mg/kg，再靜脈點(diǎn)滴腎上腺素0.3μg/kg/min,持續(xù)6小時(shí)。第五組：為EPI高劑量組，先靜脈注射LPS 6mg/kg，再靜脈點(diǎn)滴腎上腺素0.6μg/kg/min,持續(xù)6小時(shí)。備注：對(duì)照組所用生理鹽水及其劑量為參考文獻(xiàn)所得。,實(shí)驗(yàn)相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)的取樣及觀察,,,1、于LPS注射前、注射后兩小時(shí)采用內(nèi)眥靜脈取血法分別取適量血，檢測(cè)血清ALT、AST、TNFα、IL-1β和IL-10水平。2、于LPS注射后六小時(shí)斷

6、頭處死并取血，檢測(cè)血清ALT、AST、TNFα、IL-1β和IL-10水平。3、對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行解剖，取肝臟，觀察其組織病理學(xué)改變。,結(jié)果的分析方法,,,1、比較第一組與第二組的各項(xiàng)指標(biāo)：LPS是否對(duì)大鼠肝臟造成炎癥性損傷及其損傷程度。2、比較第二組與第三、四、五的各項(xiàng)指標(biāo)：EPI對(duì)LPS造成的大鼠肝臟炎癥性損傷是否具有一定的保護(hù)作用。3、對(duì)第三、四、五組的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行比較：不同劑量的EPI對(duì)大鼠肝臟炎癥性損傷的保護(hù)作用是否存

7、在劑量關(guān)系。統(tǒng)計(jì)分析：采用SPSS軟件作各組間的方差分析比較其差異性。,參考文獻(xiàn)：,1、楊文敏，曾其毅《中國(guó)循證兒科雜志》2007年2卷四期 2、Bozkurt S, Ersoy E, Tekyn HE. The cytoprotective effect of iloprost against carbon tetrachloride induced hecrosis in rat liver[J]. Res Common M