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![小麥激酶基因TaMAPK2B1和TaMAPK4分子特征及耐逆功能研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/5f42d828-a182-4742-b474-aa98df5d48eb/5f42d828-a182-4742-b474-aa98df5d48eb1.gif)
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文檔簡介
1、促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是一類普遍存在于真核生物中、進化上高度保守的絲氨酸/蘇氨酸型蛋白激酶。MAPK級聯(lián)途徑(MAPKKK-MAPKK-MAPK)以依次磷酸化方式傳遞信號,參與植物生長發(fā)育及多種生物、非生物逆境信號的轉導過程。本項研究以采用生物信息學技術獲得的6個小麥MAPKKK基因、2個小麥MAPKK基因以及12個小麥MAPK基因為基礎,系統(tǒng)研究了上述基因在不
2、同逆境下的表達特征;采用農桿菌介導的遺傳轉化技術,對其中應答低磷逆境明顯的TaMAPK2B;1和TaMAPK4進行煙草遺傳轉化,驗證了正、反義表達TaMAPK4的轉基因煙草植株應答和抵御低磷、低氮及滲透脅迫的能力。主要研究結果如下:
1、以在富集低磷逆境處理下特異表達基因的小麥根系差減cDNA文庫中獲得的小麥MAPK基因TaMAPK1a-1為基礎,通過在NCBI和TIGR網站進行BLAST查找,獲得6個小麥MAPKKK基因、2
3、個小麥MAPKK基因以及12個小麥MAPK基因的cDNA序列,對供試基因的系統(tǒng)進化等分子特征進行了分析。
2、對上述20個小麥MAPK級聯(lián)途徑基因的表達特征研究表明,其中有11個成員對低磷逆境明顯應答,包括TaMAPKKK1、TaMAPKKK7、TaMAPK2B;1、TaMAPK3、TaMAPK4、TaMAPK6、TaMAPK9、TaMAPK12、TaMAPK12;1、TaMAPK14、TaMAPK16和TaMAPK17;5個
4、成員對低氮逆境明顯應答,包括TaMAPKKK;A3、TaMAPK6、TaMAPK12;1、TaMAPK14和TaMAPK16;TaMAPK1、TaMAPK4、TaMAPK6、TaMAPK16和TaMAPK17等5個成員應答了高鹽脅迫;TaMAPK6、TaMAPK12;1和TaMAPK16等3個成員應答了干旱脅迫。
3、采用DNA重組技術構建了融合TaMAPK2B;1和TaMAPK4正、反義序列的雙元表達載體。采用農桿菌介導的遺
5、傳轉化技術,建立了正、反義表達TaMAPK2B;1和TaMAPK4的轉基因煙草株系。
4、以正反義表達TaMAPK4的煙草轉基因株系和野生型煙草株系為材料,研究了TaMAPK4介導植株抵御低磷、低氮及滲透脅迫的能力。結果表明,在低磷、低氮和鹽分脅迫下,與對照(野生型)植株相比,正反義表達TaMAPK4的轉基因植株清除活性氧的能力、植株長勢、干鮮重等均發(fā)生了明顯變化。其中正義表達植株在逆境下清除活性氧的能力增強,生長健壯,單株鮮
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