高產(chǎn)脂肽優(yōu)良納豆菌的選育.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、環(huán)脂肽是由微生物產(chǎn)生的一類生物表面活性劑,它是由親水的肽環(huán)和親油的脂肪烴鏈兩部分組成。由于其獨特的化學組成和兩親型分子結構,除具表面活性外,脂肽還具有抗真菌、抗細菌、抗病毒、抗腫瘤等生物活性,因而脂肽類在醫(yī)藥、食品、微生物采油、化妝品等領域有著很重要的應用前景。 本研究利用脂肽類表面活性劑具有溶解血細胞,并且只有產(chǎn)生表面活性劑能夠乳化碳氫化合物的菌株才能吸收利用石油形成噬油斑等生物學特性設計選育方案,采用血瓊脂平板與油平板相結合

2、的方法,從實驗室現(xiàn)存的10株納豆菌株中分離出了1株產(chǎn)脂肽的高產(chǎn)納豆菌菌株-NS-6,并以此為出發(fā)菌株,通過紫外線、微波和DES連續(xù)誘變處理,血平板或血瓊脂平板初篩和搖瓶發(fā)酵復篩相結合的方法,獲得了一株突變株-NS-64,其脂肽產(chǎn)量比誘變前提高了132.8%,在未經(jīng)優(yōu)化的搖瓶發(fā)酵條件下,脂肽的發(fā)酵得率由出發(fā)菌株的1.120g/L提高到2.607g/L。菌株經(jīng)多次傳代,遺傳性狀穩(wěn)定。 在單因素實驗和正交試驗的基礎上,先用Placke

3、tt-Burman(PB)方法對影響菌株NS-64液體發(fā)酵培養(yǎng)基諸因素的效應進行評價,篩選出了三個影響較大的重要因素,分別為:蛋白胨、酵母粉、CaCl2,利用響應面分析法(RSM)確定了它們的最佳工藝參數(shù)。實驗結果表明,菌株NS-64發(fā)酵產(chǎn)脂肽的最佳培養(yǎng)基組成為:蛋白胨1.73%,蔗糖0.5%,酵母粉0.063%,MgSO4·7H2O8.0×10-4mol/L,磷源0.05mol/L(Na2HPO4·12H2O:KH2PO4=4:3,摩

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