1、BMP4是BMPs蛋白家族中的一員，對(duì)卵泡顆粒細(xì)胞與膜細(xì)胞類(lèi)固醇激素的分泌以及顆粒細(xì)胞分化有著調(diào)節(jié)作用，并且在有些物種上對(duì)顆粒細(xì)胞的增殖或凋亡也產(chǎn)生影響。而顆粒細(xì)胞的增殖與凋亡對(duì)卵泡發(fā)育來(lái)說(shuō)至關(guān)重要。因此，本試驗(yàn)擬探究BMP4對(duì)鵝等級(jí)前卵泡顆粒細(xì)胞增殖或凋亡的影響。通過(guò)基因克隆獲得鵝的BMP4基因完整CDS區(qū)序列，并采用實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)檢測(cè)其在不同發(fā)育階段卵泡的顆粒細(xì)胞與膜細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量。通過(guò)構(gòu)建其真核表達(dá)載體pEGFP-N1-BM

2、P4，使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法對(duì)顆粒細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染來(lái)探究BMP4對(duì)鵝顆粒細(xì)胞增殖與凋亡的影響。取得的主要研究結(jié)果如下:
　　(1)鵝BMP4基因CDS區(qū)序列全長(zhǎng)為1212bp，其核苷酸序列與斑胸草雀的同源性高達(dá)96.3％，編碼的氨基酸序列同源性為98.3％。
　　(2)鵝BMP4基因mRNA在顆粒細(xì)胞中的相對(duì)表達(dá)量均高于其在相同卵泡發(fā)育階段的膜細(xì)胞中的表達(dá)量（卵泡直徑為6～8mm的發(fā)育階段除外）。BMP基因mRNA在小卵泡顆粒細(xì)胞中表

3、達(dá)量較低，隨后表達(dá)量逐漸上升，于直徑8～10mm的卵泡及F5中表達(dá)量達(dá)到最高，隨后又開(kāi)始迅速下降。膜細(xì)胞BMP4基因mRNA表達(dá)量在直徑6～8mm的卵泡中最高，且這一卵泡發(fā)育階段中BMP4基因mRNA在膜細(xì)胞表達(dá)量要高于顆粒細(xì)胞，而在卵泡其他發(fā)育階段中膜細(xì)胞BMP4 mRNA表達(dá)量均低于顆粒細(xì)胞。
　　(3)顆粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染36h后，BMP4轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染組OD值顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，其他組無(wú)顯著性差異。說(shuō)明在轉(zhuǎn)染BMP4基因36