1、目的：研究造血干細胞移植時，醛脫氫酶(ALDH)活性能否作為造血干/祖細胞的標志。 方法：收集9份外周血干細胞移植物標本，每份標本分為室溫組、4℃組、-80℃組儲存，選擇采集當天(d0)、第1天(d1)、第3天(d3)、第7天(d7)四個時間點進行檢測。 檢測方法： (1)流式細胞術(FCM)檢測低側向角強熒光(SSC<'lo>ALDH<'br>)細胞數(shù)，熒光顯微鏡下觀察熒光細胞。 (2) FCM檢測CD

2、34<'+>細胞數(shù)。 (3)半固體瓊脂法培養(yǎng)造血干/祖細胞粒.巨噬細胞集落形成單位(CFU-GM)。 結果： 1.移植物經(jīng)ALDH活性檢測試劑盒(ALDEFLUOR)處理后通過FCM可檢測到SSC<'lo>ALDH<'br>細胞。在熒光顯微鏡下可觀察到綠色熒光細胞。 2.采集當天，樣本的SSC<'lo>ALDH<'br>細胞數(shù)為(1.40±0.65)％，CD34<'+>細胞數(shù)為(2.01±1.20)％，C

3、FU-GM數(shù)為(19.33±11.85)個/5×10<'6>cells，三種檢測指標的結果一致。 3.室溫儲存后樣本的SSC<'lo>ALDH<'br>細胞數(shù)及CFU-GM數(shù)隨儲存時間的延長而快速下降，儲存后d1、d3、d7與d0相比差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，兩者的下降曲線一致。CD34<'+>細胞數(shù)下降較為緩慢，直至d7時方呈明顯下降。 4.4℃下儲存d1及d3時，樣本的SSC<'lo>ALDH<'br>數(shù)及

4、CFU-GM數(shù)與d0相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，d7時呈明顯下降，與d0相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；CD34<'+>細胞數(shù)下降但幅度較小，d7與d0相比差異仍然無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，CD34<'+>細胞數(shù)和CFU-GM數(shù)的下降曲線出現(xiàn)分離。 5.-80℃直接凍存后的d1、d3、d7，樣本的SSC<'lo>ALDH<'br>細胞數(shù)、CD34<'+>細胞數(shù)和CFU-GM數(shù)和d0相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0