1、目的：檢測(cè)并分析乳腺癌細(xì)胞中蛋白精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2（protein arginine methyltransferase2，PRMT2）的下游靶基因，檢測(cè)PRMT2表達(dá)下調(diào)后對(duì)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，并初步探討乳腺癌細(xì)胞中PRMT2調(diào)控細(xì)胞周期蛋白D1（Cyclin D1，CCND1）的分子機(jī)制。
　　方法：采用基因芯片技術(shù)對(duì)乳腺癌細(xì)胞中 PRMT2的下游靶基因進(jìn)行檢測(cè)及分析。從基因芯片結(jié)果所檢測(cè)出的PRMT2下游靶基因中，選取較有意

2、義的靶基因，利用熒光定量PCR對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證和分析。利用Western Blot檢測(cè)乳腺癌細(xì)胞中PRMT2表達(dá)下調(diào)后對(duì)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響，并初步探討PRMT2調(diào)控CCND1的分子機(jī)制。
　　結(jié)果：
　　1、基因芯片檢測(cè)顯示：PRMT2影響多個(gè)基因的表達(dá)，這些基因涉及多個(gè)生物過程及相應(yīng)的細(xì)胞信號(hào)通路，包括：細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、癌變、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、免疫應(yīng)答等，其中CCND1是PRMT2的重要靶基因之一。
　　2、熒光定量PC

3、R驗(yàn)證結(jié)果提示：乳腺癌細(xì)胞中PRMT2基因表達(dá)的下調(diào)導(dǎo)致靶基因CCND1表達(dá)的上調(diào)，且與基因芯片的結(jié)果保持一致。
　　3、Western Blot檢測(cè)蛋白的表達(dá)結(jié)果示：乳腺癌細(xì)胞中PRMT2蛋白表達(dá)下調(diào)后導(dǎo)致CCND1蛋白表達(dá)上升，且在雌激素(17β-estrodiol, E2)預(yù)處理后更明顯。
　　4、Western Blot檢測(cè)表明：乳腺癌細(xì)胞中PRMT2通過影響Akt/GSK-3β細(xì)胞信號(hào)通路抑制CCND1蛋白的表達(dá)。