1、研究背景與目的：
　　冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(coronary heart disease，CHD)是威脅人類健康的主要疾病之一。在冠心病的病理進程中，血脂代謝異常是冠心病的主要發(fā)病機制，其中高甘油三酯血癥（hypertriglyceridemia，HTG）與冠心病的的發(fā)生、發(fā)展關系密切。研究表明遺傳性高甘油三酯血癥可以由多種基因突變引起，其中脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase，LPL)是甘油三酯代謝途徑的限速酶，

2、在甘油三酯代謝中起重要作用。近年研究表明LPL基因突變在冠心病的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。為探討LPL基因突變和基因多態(tài)性對冠心病發(fā)病的影響，我們對山東地區(qū)漢族人群CHD患者中HTG病人進行LPL基因外顯子突變篩選，從分子水平尋找LPL基因序列改變，為預防和治療冠心病提供了新的基因分子靶點。
　　研究對象及方法：
　　研究對象:病例組研究對象為聊城市人民醫(yī)院心內科住院病人，正常對照組為聊城市人民醫(yī)院體檢中心的正常健康人。所有研究

3、對象均為漢族，研究個體間無血緣關系，且均排除肝、腎、腫瘤、甲狀腺疾病。從1200例冠心病病人中篩選出120例高甘油三酯血癥患者，并選擇年齡性別及生活條件相同的對照組正常人118例。實驗方法:病人和對照均按照要求填寫知情同意書。所有研究對象在空腹12小時以上時，采集3ml靜脈血于EDTAK2抗凝管中，分離提取基因組DNA，按照LPL基因序列設計引物擴增LPL基因的9個編碼外顯子，用PCR法對其LPL基因的外顯子目的片段進行擴增，經凝膠電泳

4、確認得到PCR產物后，用ABI3700進行DNA測序分析。
　　結果：
　　在120例合并高甘油三酯血癥的冠心病患者中，我們發(fā)現(xiàn)LPL基因外顯子8和9上存在兩種變異，一種為外顯子8中的c.1164C→A突變(Thr388→Thr)，未改變氨基酸序列，為同義突變，其中雜合突變?yōu)?5例，純合突變?yōu)?例;另一種為外顯子9存在的c.1421 C→G突變(Ser447→Ter)，產生終止密碼子，其中發(fā)現(xiàn)雜合突變14例，純合突變1例;另

5、外發(fā)現(xiàn)LPL基因內含子5種突變: c.429+20A＞C，c.430-6C＞T，c.430-34C＞A，c.775+3T＞C，c.1140-7T＞G，均為雜合突變。未發(fā)現(xiàn)已報道的脂蛋白酯酶催化活性中心Asp156-His241-Ser132(外顯子4及5)的突變。在118例正常對照組中，外顯子9上的Ser447→Ter突變，共發(fā)現(xiàn)22例，全部為雜合突變，由于此突變在正常人中同樣存在，表明此終止密碼子突變屬于基因多態(tài)性。我們對以上LPL基

6、因突變的發(fā)生率進行計算，結果表明:
　　1.LPL基因編碼區(qū)外顯子8突變Thr388→Thr及外顯子9突變Ser447→Ter存在于我們研究的漢族人群中。其中外顯子9突變Ser447→Ter基因型分布為:CC型占84.45％(201例)，CG型占15.13％(36例)，GG型占0.42％(1例)。冠心病組和正常對照群體等位基因頻率符合Hardy-Weinberg平衡(x2=0.46875，1.2471，df=1，P＝0.9333，

7、0.90678)，可以認為具有人群代表性。
　　2.LPL基因突變Ser447→Ter在中青年組（＜60歲）和老年組（≥60歲）兩個年齡組的分布差異無統(tǒng)計學意義。(x2=1.743，0.044:; df=2，1;P=0.418，0.835;)
　　3.LPL基因突變Ser447→Ter在男女性別組的分布差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.976，0.022:; df=2,1;P=0.614,0.882;)。
　　4.對于LPL

8、基因突變Ser447→Ter，冠心病組與正常人組等位基因的頻率差異無顯著性(x2=1.711，df=1，P＝0.191)。冠心病組和正常人組三種基因型頻率無顯著性差異(x2=3.164，d f=2，P=0.206)。X基因型攜帶者與非攜帶者罹患冠心病的風險無顯著差異(OR=1.426;95％CI=0.729～2.788; P=0.298)。
　　結論：
　　本研究發(fā)現(xiàn)LPL基因編碼區(qū)外顯子8基因突變Thr388→Thr及外顯

9、子9基因突變Ser447→Ter存在于山東漢族人群中。冠心病組高甘油三酯血癥病人及正常人的LPL基因編碼區(qū)基因突變Ser447→Ter無年齡和性別差異，表明此突變屬于基因多態(tài)性。同時發(fā)現(xiàn)冠心病組高甘油三酯血癥病人及正常人LPL基因編碼區(qū)Ser447→Ter等位基因頻率、三種基因型頻率無顯著性差異。此研究未發(fā)現(xiàn)高甘油三酯血癥病人中LPLSer447→Ter基因突變明顯高于正常人，并不排除LPL其它基因突變在高甘油三酯血癥發(fā)生中的作用，今后