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文檔簡介
1、益生菌作為一種飼料添加劑,在畜牧業(yè)生產(chǎn)中得到越來越廣泛的應用,其飼喂效果也得到了畜牧從業(yè)者和學者的廣泛認可。但益生菌的益生特性表現(xiàn)出較為明顯的菌株差異,因此要得到益生性能優(yōu)良的益生菌株,就要進行大量的篩選工作。實驗室前期分離保存了一株具有高膽鹽耐受特性的益生菌,本課題對該株益生菌的種屬、益生特性及安全性進行了系統(tǒng)的研究。具體研究內(nèi)容及結果如下:
(1)通過形態(tài)學觀察、生化鑒定及16S rDNA序列比對分析,確定該菌株為屎腸球菌
2、(Enterococcus faecium),并命名為屎腸球菌SQ-1。
?。?)對該株菌開展了體外益生特性研究,實驗結果表明:SQ-1具有較好的耐酸、耐膽鹽、耐高溫、耐消化酶等特性。在pH2.0的條件下培養(yǎng)3h仍有61.93%的存活率;在膽鹽濃度為0.3%的條件下培養(yǎng)3h有90.37%的存活率,膽鹽濃度達0.6%時仍有49.7%的存活率;在60℃環(huán)境中處理15min仍有77.66%的存活率;經(jīng)過1.2%的胰蛋白酶處理3h后有3
3、1.01%的存活率。這些實驗結果表明該株菌具有較好的抗逆性,且對高濃度膽鹽的耐受性較為突出。采用碳氫化合物黏著法檢測該菌的疏水性,結果表明 SQ-1疏水率為34.53%,具有中等疏水性。在對沙門氏菌(CVCC3377)和金黃色葡萄球菌(CICC23926)的抑菌實驗中,抑菌圈直徑分別為11mm和13mm,具有中等抑菌作用。
?。?)進行了SQ-1對小鼠單核-巨噬細胞吞噬功能和血清中IgG、IL-2含量影響的研究。碳粒廓清實驗結果
4、表明,口服1×109cfu/mL的屎腸球菌SQ-1組與對照組比較,廓清指數(shù)出現(xiàn)顯著性(P<0.05)升高,表明該菌株對小鼠的吞噬功能具有顯著的增強作用;血清中IgG含量檢測結果顯示,口服1×109cfu/mL的屎腸球菌SQ-1組與對照組相比較, IgG含量有極顯著性(P<0.01)升高;而IL-2含量無顯著性差異。這些實驗結果,說明屎腸球菌SQ-1對小鼠的免疫功能具有增強作用。
?。?)對屎腸球菌SQ-1開展了安全性研究,實驗包
5、括:對20種抗生素敏感性檢測、毒力基因PCR檢測和小鼠口服屎腸球菌SQ-1后的臟器指數(shù)、血常規(guī)檢測以及組織切片觀察等??股孛舾行詫嶒灲Y果表明,屎腸球菌SQ-1對8種抗生素敏感,其中最具有代表性的萬古霉素抑菌圈直徑為19mm;對常見的六種毒力基因(Asa1、cylA、efaA、esp、gelE、hyl)的PCR檢測結果表明,屎腸球菌SQ-1不存在這六種毒力基因。在口服屎腸球菌 SQ-1的安全性研究中,實驗組和對照組相比較,臟器指數(shù)和血常
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