1、背景:
　　NK/T細胞淋巴瘤(NKTCL)是惡性淋巴瘤的一種亞型，高發(fā)于亞洲和南美洲人群。在發(fā)病機制、診斷分型及臨床治療上都比較復(fù)雜。早期腫瘤比較局限，但可以很快發(fā)展至全身。具有侵襲性高，病程進展快，生存期短，對含蒽環(huán)類化療方案耐藥和預(yù)后差等特點。因此，尋找其發(fā)病原因及耐藥機制十分必要。
　　目的:
　　1.檢測ABCC4基因在NK/T細胞淋巴瘤細胞株和組織中的表達情況。
　　2.探討ABCC4基因表達情況和臨

2、床療效的關(guān)系。
　　3.構(gòu)建ABCC4基因高表達和干擾表達慢病毒載體，進一步檢測其表達量對NK/T細胞淋巴瘤的影響。
　　方法:
　　1.利用數(shù)字基因表達譜（digitalgeneexpression，DGE）技術(shù)和耐藥相關(guān)基因PCR基因芯片技術(shù)初步檢測出ABCC4基因在NK/T細胞淋巴瘤細胞株中的表達情況。
　　2.應(yīng)用實時熒光定量PCR(Realtime-PCR)技術(shù)檢測NK/T細胞淋巴瘤SNK-6、YTS細

3、胞株與正常NK細胞ABCC4基因的表達情況。
　　3.免疫組織化學(xué)法(IHC)檢測110例組織標(biāo)本其中NK/T細胞淋巴瘤(60例)組織及鼻炎和鼻息肉組織（50例）中ABCC4基因蛋白表達水平。
　　4.根據(jù)ABCC4基因mRNA序列，設(shè)計二個靶向ABCC4基因的靶點，設(shè)計shRNA序列。設(shè)計引物，PCR擴增ABCC4基因cDNA序列，測序鑒定，構(gòu)建慢病毒載體pCDH-ABCC4和pLL3.7-ABCC4-siR。制備出重組慢

4、病毒Lenti-ABCC4和Lenti-ABCC4-siR。
　　5.通過Realtime-PCR和Westernblot技術(shù)評價感染慢病毒后的NK/T細胞淋巴瘤細胞株ABCC4基因表達情況，同時篩選出沉默效率最高的shRNA。
　　6.CCK-8實驗和流式細胞術(shù)實驗檢測不同藥物作用于正常表達及高表達和低表達ABCC4基因NK/T細胞淋巴瘤細胞株的敏感性。
　　結(jié)果:
　　1.實時熒光定量PCR(Realtime

5、-PCR)技術(shù)和免疫組織化學(xué)法結(jié)果顯示，與正常NK細胞相比較，ABCC4基因在NK/T細胞淋巴瘤細胞株和組織上高表達，其表達量的高低和臨床療效呈負相關(guān)。
　　2.成功構(gòu)建了慢病毒表達載體pCDH-ABCC4、pLL3.7-ABCC4-siR，并制備出重組慢病毒Lenti-ABCC4和Lenti-ABCC4-siR，篩選出有效的干擾重組病毒，感染NK/T細胞淋巴瘤細胞株后能有效提高和降低ABCC4基因的表達。
　　3.降低AB