1、背景：椎間盤退變是引起下腰痛的重要原因之一，在退變的椎間盤中，髓核細胞大量凋亡。有研究發(fā)現(xiàn)，胰島素樣生長因子-1（IGF-1）有明顯抑制軟骨細胞凋亡的作用，表明IGF-1可能會有抑制類軟骨細胞—髓核細胞凋亡的作用。
　　目的：本實驗通過建立家兔椎間盤髓核細胞體外培養(yǎng)模型，利用白介素-1（IL-1）誘導(dǎo)培養(yǎng)的家兔椎間盤髓核細胞凋亡，用 IGF-1對凋亡模型進行干預(yù)，探討胰島素樣生長因子-1（IGF-1）對髓核細胞凋亡的抑制作用，揭示

2、其抗凋亡作用機制，為IGF-1防治椎間盤退變提供理論依據(jù)。
　　方法：1.從健康家兔取出椎間盤髓核，用Ⅱ型膠原酶消化法分離原代椎間盤髓核細胞后，單層培養(yǎng)并以胰酶消化法傳代，采用差速貼壁法進行純化。2.采用Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色、甲苯胺藍染色對髓核細胞進行鑒定。3.按空白組、IGF-1組（IGF-1、IL-1兩種細胞因子共同作用）和IL-1組（僅IL-1因子作用）進行分組處理。4.利用光學(xué)顯微鏡、Giemsa染色、原位末端標記（T

3、UNEL）技術(shù)進行觀察，以 Annexin-v/PI雙染細胞后，用流式細胞儀測定的各組髓核細胞早期和晚期凋亡率作為凋亡檢測指標。
　　結(jié)果：1.IL-1組光鏡下可見大量髓核細胞凋亡，并可見典型的細胞凋亡形態(tài)學(xué)改變， IGF-1組可見少量細胞凋亡，空白組罕見凋亡征象。2.Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色呈強陽性，甲苯胺藍染色呈異染性。3.原位末端標記顯示：空白組凋亡率為（0.45±0.06），IL-1組凋亡率為（17.80±5.11），IG

4、F-1組凋亡率為（6.11±1.39）。與IL-1組比較, IGF-1組細胞凋亡率明顯降低，差異有顯著性（P<0.01）；與空白組比較， IL-1組細胞凋亡率明顯增加，差異有顯著性（P<0.01）。4.流式細胞儀檢測顯示：空白組早期凋亡率為（0.49±0.05），晚期凋亡率為（0.21±0.06）；IL-1組早期凋亡率為（22.16±2.69），晚期凋亡率為（12.98±2.02）；IGF-1組早期凋亡率為（5.03±0.96），晚期凋

5、亡率為（7.98±1.37）。與IL-1組比較, IGF-1組細胞早期和晚期凋亡率都明顯降低，差異均有顯著性（P<0.01）。與空白組比較，IL-1組早期和晚期凋亡率都明顯增高，差異均有顯著性（P<0.01）。
　　結(jié)論：1.本研究建立了簡單易行的髓核細胞分離、培養(yǎng)方法；原代、第二代細胞生長良好，表型穩(wěn)定，適合于實驗研究，髓核細胞四代培養(yǎng)后，細胞表型發(fā)生改變。2. IL-1可以誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的髓核細胞凋亡。3. IGF-1對IL-1