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文檔簡介
1、目的:探討9型腺相關病毒介導細胞周期素A2因子促進梗死后心肌自身修復和重啟細胞周期進程的可行性。
方法:80只小鼠隨機分為Sham組(n=20)、rAAV9-eGFP組(n=30)和rAAV9-Cyclin-A2組(n=30)。病毒滴度為2×1011vg/ml,稀釋于生理鹽水中,每只小鼠注射200ul病毒稀釋液,通過尾靜脈注射至小鼠體循環(huán),Sham組僅通過尾靜脈注射等量生理鹽水。注射一周后建立心肌梗死模型,觀察時間為3周。心臟
2、超聲檢查評價心功能情況。Western blot檢測目的蛋白Cyclin-A2及增殖相關蛋白PCNA、H3P的表達。免疫組化、免疫熒光檢測相關因子在心肌中的定位和表達。利用Masson三染檢測膠原容積以評價心室重構情況。
結果:Western blot顯示,rAAV9-Cyclin-A2組細胞周期素A2因子在注射后第2周可獲得穩(wěn)定表達并可至少持續(xù)至第4周。相比于空白組和rAAV9-eGFP組差異具有明顯統(tǒng)計學意義(P<0.01
3、)。增殖細胞核抗原和磷酸組蛋白H3在rAAV9-Cyclin-A2組明顯高于其余兩組,差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。心臟干細胞標志物 C-kit和Connexin-43在rAAV9-Cyclin-A2組表達明顯升高,相比于空病毒組差異明顯。免疫組化和免疫熒光顯示細胞周期素A2因子主要定位于細胞核中。Masson染色顯示 rAAV9-Cyclin-A2組膠原含量少于空白組和rAAV9-eGFP組,差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.029
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