1、人參(PanaxginsengC.A.Meyer)作為一種傳統(tǒng)的中草藥,對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有協(xié)調(diào)大腦興奮與抑制、對(duì)抗氧化損傷、提高大腦機(jī)能、改善疲勞、增強(qiáng)大腦學(xué)習(xí)與記憶等功能。人參皂甙(Ginsenosides,GS)是人參的主要活性成分,雖然含量微少但卻是發(fā)揮藥理作用的主要成分。目前已從人參屬植物中分離提取出40多種GS單體。人參皂甙Rd(Ginsenoside-Rd,GSRd)是GS的重要組成成分之一。通過(guò)大量的臨床和基礎(chǔ)研究表明,

2、GSRd在神經(jīng)系統(tǒng),心血管系統(tǒng)和腎臟系統(tǒng)等中顯示出獨(dú)特的藥理作用。近年的研究顯示,GSRd具有明顯的神經(jīng)保護(hù)作用,如可保護(hù)神經(jīng)元抵抗過(guò)氧化物和糖氧剝奪(oxygen-glucosedeprivation,OGD)損傷,減少動(dòng)物腦缺血梗死提及和促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)等。我們最新研究發(fā)現(xiàn),GSRd能夠抑制高濃度谷氨酸(Glu)和N-甲基-D-天門冬氨酸受體(NMDAreceptor,NMDAR)介導(dǎo)的大量鈣內(nèi)流[1],提示GSRd可能通過(guò)作用于N

3、MDAR發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用,但具體作用機(jī)制尚未明確。結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道,GSRd及其類似單體物質(zhì)可調(diào)節(jié)多種蛋白質(zhì)的磷酸化并影響其功能[2-5],我們提出假說(shuō):GSRd可能通過(guò)影響NMDAR的磷酸化從而發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用。因此,本課題研究大腦中動(dòng)脈栓塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型及OGD模型損傷后,GSRd對(duì)NMDA受體磷酸化的影響,以揭示GSRd腦保護(hù)的可能性機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)一GSRd對(duì)腦缺

4、血模型大鼠神經(jīng)功能評(píng)分及梗死體積的影響
　　目的:建立大鼠MCAO模型并驗(yàn)證GSRd處理后對(duì)于大鼠神經(jīng)功能評(píng)分及腦梗死體積的影響。方法:建立大鼠MCAO模型,并在術(shù)前1小時(shí)及術(shù)后即刻給予不同濃度GSRd(10、50mg/kg),之后進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分,通過(guò)TTC染色觀察腦梗死體積變化,結(jié)果:GSRd能夠改善大鼠神經(jīng)功能評(píng)分,減小模型大鼠腦梗死體積;結(jié)論:GSRd處理能夠明顯改善大鼠腦梗的體積和癥狀
　　實(shí)驗(yàn)二GSRd對(duì)MCAO

5、后NMDA受體NR2B亞基及其磷酸化的影響
　　目的:在大鼠MCAO模型的基礎(chǔ)上研究GSRd對(duì)梗死區(qū)NMDA受體NR2B亞基及其不同磷酸化位點(diǎn)的影響。方法:采用westernblot方法檢測(cè)腦缺血區(qū)不同時(shí)間點(diǎn)NR2B及其磷酸化的Ser1303、Tyr1472、Ser1480位點(diǎn)的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)MCAO模型大鼠腦缺血損傷處的NR2B亞基、磷酸化Ser1303、Tyr1472、Ser1480表達(dá)水平較假手術(shù)組升高;(2)在MC

6、AO術(shù)前1小時(shí)及術(shù)后即刻給予不同濃度GSRd(10、50mg/kg),能夠有效降低大鼠腦缺血損傷側(cè)皮層的NR2B亞基、Ser1303、Tyr1472及Ser1480表達(dá)量,且呈劑量依賴性。結(jié)論:GSRd能夠有效降低MCAO模型中NR2B及磷酸化Ser1303、Tyr1472、Ser1480的水平,提示GSRd可能上述位點(diǎn)起到調(diào)節(jié)作用。
　　實(shí)驗(yàn)三GSRd對(duì)糖氧剝奪損傷神經(jīng)元NR2B亞基及其磷酸化的影響
　　目的:在培養(yǎng)的離體

7、神經(jīng)元中進(jìn)行OGD實(shí)驗(yàn),并研究GSRd處理后對(duì)于神經(jīng)元NMDA受體NR2B亞基及其不同磷酸化位點(diǎn)的影響。方法:采用離體培養(yǎng)神經(jīng)元OGD模型,并用Westernblot檢測(cè)NR2B亞基及其Ser1303、Tyr1472、Ser1480位點(diǎn)的磷酸化程度。結(jié)果:10μMGSRd預(yù)處理離體培養(yǎng)的神經(jīng)元,可下調(diào)OGD造成的NR2B亞基及磷酸化Ser1303、Tyr1472、Ser1480的水平升高。結(jié)論:GSRd能夠有效降低OGD模型中NR2B及