1、目的：觀察腦死亡狀態(tài)下及腦死亡至心臟死亡過程中的生命體征變化。探討肝臟在腦死亡狀態(tài)下的損傷情況及其發(fā)生機制。探討黃芪多糖(APS)在家兔腦死亡至心臟死亡過程中對肝臟的保護作用及其可能機制。本實驗分為兩大部分
　　 第一部分：復制漸進性顱內加壓腦死亡模型，觀察誘導腦死亡及腦死亡至心臟死亡過程中的生命體征變化。
　　 方法：采用健康成年新西蘭兔12只，雌雄不拘，體重(2.8±0.3)Kg，隨機分為假手術組(C組)、腦死亡4h

2、組(B1組)及腦死亡8h組(B2組)，每組4只。C組氣管插管，股動靜脈穿刺置管；鉆孔顱內置Foley球囊導管，但不加壓，麻醉8h。B1、B2組加壓復制腦死亡模型后分別維持4h、8h，監(jiān)測腦死亡建立過程中MAP、HR、RR變化及停止搶救后向心臟死亡過程中MAP、HR值變化，記錄撤除搶救措施至心臟死亡時間。
　　 第二部分：腦死亡狀態(tài)對肝臟功能與形態(tài)的影響及其機制，黃芪多糖對腦死亡家兔肝臟的保護作用。
　　 方法：健康成年新

3、西蘭兔24只，雌雄不拘，體重(2.8±0.3)Kg，隨機分為假手術組(C組)、腦死亡組(B組)、黃芪多糖(APS)保護組(S組)，每組8只。B、S組運用漸進性顱內加壓腦死亡模型，誘導腦死亡；C組，鉆孔顱內置Foley球囊導管，但不加壓，其他同B、S組。S組為黃芪多糖干預的腦死亡組，于麻醉后即刻經股靜脈推注注射用黃芪多糖(APS)12mg/kg。C組假手術后4h(T1)，B組與S組誘導腦死亡后4h(T1)隨機抽4只新西蘭兔取標本，另4只新

4、西蘭兔于假手術后8h(T2)及誘導腦死亡后8h(T2)取標本。股動脈抽取血液標本5mL并切取肝臟組織凍存?zhèn)錂z。檢測血清急性肝損指標丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)，酶聯免疫吸附測定法(ELISA)測定血清TNF-α。HE染色觀察肝組織病理學改變，免疫組織化學技術檢測肝組織NF-κB p65蛋白的表達情況。運用逆轉錄PCR(RT-PCR)法檢測肝組織ICAM-1 mRNA的轉錄水平。測定T1肝組織中總超氧化物歧化酶

5、(T-SOD)的活性。
　　 結果：第一部分：腦死亡組顱內加壓后，平均動脈壓明顯上升(p<0.05)；腦死亡組BD2h后HR較加壓前明顯下降(p<0.05)；腦死亡組加壓后RR較加壓前上升(p<0.05)；腦死亡組在停止搶救后0.5min、3min、6min時MAP、HR均低于對照組，差別有統(tǒng)計學意義；停止搶救后，B1組與B2組心臟存活時間，差別無統(tǒng)計學意義。
　　 第二部分：1、血清ALT、AST、TNF-α水平：C組

6、T1、T2三指標無顯著性差異(P>0.05)。B組、S組相同時間點均顯著高于C組(P<0.05)。B組T2各指標顯著高于T1(P<0.05)。S組T2 ALT、TNF-α水平顯著高于T1(P<0.05)，AST兩時間點差異不顯著(P>0.05)。S組各時間點三指標均顯著低于B組(P<0.05)。
　　 2、免疫組化檢測肝組織NF-κB p65蛋白表達：采用圖像定量分析軟件測量平均光密度值(OD)對免疫組化結果進行定量分析。3組N

7、F-κB p65蛋白T1表達水平相似，相對較弱，OD值無顯著性差異(P>0.05)。B組、S組T2表達較T1明顯增強(P<0.05)。C、S組各組內OD值T1、T2無顯著差異(P>0.05)。B組表達T2較T1顯著性增強(P<0.05)。S組相應時間點蛋白表達量均低于B組(P<0.05)。
　　 3、RT-PCR：ICAM-1 mRNA轉錄水平，C組各時間點無顯著性差異(P>0.05)；B、S組T2表達均強于T1(P<0.05)

8、。3組對應時間點轉錄水平亦有顯著性差異(P<0.05)。
　　 4、T1時S組肝組織中總超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性較C、B組明顯升高(P<0.05)。
　　 5、HE染色光鏡下：C組肝臟組織結構正常。B組T2點肝細胞明顯腫脹，排列紊亂擁擠，肝竇受壓變窄，胞質疏松淡染呈網狀，氣球樣改變，匯管區(qū)炎性細胞浸潤。S組T2點肝細胞增大水腫，胞質疏松，少量炎性細胞浸潤。
　　 結論：1、漸進式顱內加壓誘導腦死亡后，通

9、過呼吸機輔助呼吸及應用血管活性藥物等措施，能較長時間維持腦死亡機體血流動力學穩(wěn)定。腦死亡后，搶救措施得當可以使心臟功能長時間的不衰。停止搶救后，MAP、HR呈漸進性下降，短時間內即全部進入無心跳死亡(Non heart beating death，NHBD)。
　　 2、腦死亡狀態(tài)下兔血清ALT、AST、TNF-α水平升高。肝臟組織粘附分子ICAM-1 mRNA的轉錄水平表達升高。肝組織中NF-κB p65蛋白的翻譯水平增加。升