1、目的:在移植技術(shù)已經(jīng)相對(duì)成熟的今天，供體資源緊缺已成為制約器官移植發(fā)展的主要原因。在美國(guó)，每天約有18個(gè)人因等不到供體器官而死亡，其器官供需比例約為1∶3;在中國(guó)，這一比例高達(dá)1∶30。為達(dá)到完全脫離胰島素，胰島移植常需將來(lái)源于多個(gè)供體的胰島移植給一名受體，這在一定程度上加大了胰腺器官供求之間的距離。目前雖然已有活體胰島移植成功的個(gè)案報(bào)道，但供、受體可能因此承受?chē)?yán)重的生理和心理負(fù)擔(dān)，不被廣泛接受。心死亡供體胰腺因熱缺血損傷不適合胰腺移植

2、，可成為胰島移植的寶貴資源，這在國(guó)外已有報(bào)道。本研究以腦死亡供體胰腺為參照，探索心死亡供體胰腺是否適用于臨床胰島移植。
　　方法:UW液器官灌注后，標(biāo)準(zhǔn)多器官采集技術(shù)獲取9名心死亡供體及5名腦死亡供體肝臟、胰腺等器官，UW液靜置保存送入手術(shù)室。在無(wú)菌條件下去除脾臟、十二指腸，將胰腺送入GMP實(shí)驗(yàn)室;經(jīng)胰腺修剪去除多余的脂肪組織及筋膜、LiberaseMTF C/T注射器灌注胰腺，灌注滿(mǎn)意后切成體積約3×3×1cm3的組織塊放入消化

3、罐中開(kāi)始消化過(guò)程，溫度控制在36-38℃之間;每2分鐘復(fù)取樣一次，DTZ染色，倒置相差顯微鏡下觀察。當(dāng)游離胰島細(xì)胞百分比（游離胰島細(xì)胞比胰島細(xì)胞總數(shù)）大于50％時(shí)，用含10％人血白蛋白的終止液終止消化。反復(fù)離心、去上清液以洗掉殘余的消化酶;COBE2991細(xì)胞收集器、Biocoll連續(xù)密度梯度離心純化胰島。比較不同供體胰島純化前后胰島當(dāng)量、每克胰腺組織胰島當(dāng)量及胰島純度;FDA/PI染色倒置相差顯微鏡下觀察并計(jì)算胰島存活率;葡萄糖刺激實(shí)

4、驗(yàn)評(píng)價(jià)胰島體外功能。比較不同批次Liberase MTF C/T消化時(shí)間、胰島產(chǎn)量，以了解不同批次的酶是否影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，Liberase MTF C/T消化結(jié)果是否具有可重復(fù)性。
　　結(jié)果:兩組胰腺供體年齡、體重、胰腺重量、冷缺血時(shí)間無(wú)差異(P＞0.05)。心死亡供體胰腺純化前后胰島當(dāng)量、每克胰腺組織胰島當(dāng)量分別為814964.89±34949.52、448144.22±63230.98、10928.80±1021.73/g和60

5、47.3707±1128.35/g;腦死亡供體胰腺分別為817326.80±21791.49、498056.00±27319.09、11278.69±880.78/g、6866.9481±542.07/g，兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。心、腦死亡供體胰腺純化前后胰島純度分別為5.0±0.7％vs.5.2±0.8％，P＞0.05;64.4±5.9％ vs.66.4±4.7％，P＞0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩組純化后胰島存活率分

6、別為91±2％、92±3％，P＞0.05。腦死亡組只有5個(gè)胰腺，不能滿(mǎn)足不同批次Liberase至少包含2個(gè)胰腺，故未做統(tǒng)計(jì)分析。心死亡組，N（批次1）=4、N（批次2）=2N（批次3）=3;三組間胰島產(chǎn)量無(wú)差別。
　　結(jié)論:供體器官短缺是全世界面臨的難題;本研究發(fā)現(xiàn)心死亡供體在熱缺血時(shí)間小于19.1±1.8min情況下，分離胰島產(chǎn)量、純度、存活率同腦死亡組相當(dāng)，可用于臨床胰島移植。不同批次LiberaseMTF C/T間變異度小