1、目的： 通過影像學、組織學、免疫組織化學(骨形態(tài)發(fā)生蛋白2，BMP-2)觀察，骨組織形態(tài)計量學、骨密度(bone mineral density，BMD)和生物力學測量，探討雷尼酸鍶(strontium ranelate，SR)對大鼠股骨骨質(zhì)疏松性骨折(Osteoporoticfracture，OPF)愈合的影響。 方法： 1.骨質(zhì)疏松動物模型的建立：6個月Wistar雌性處鼠60只，體重220～280 g，大鼠

2、飼養(yǎng)于天津醫(yī)科大學動物實驗中心。每只大鼠，用10％水合氯醛(0.3 g/kg)腹腔注射麻醉，麻醉效果滿意后，用雙能X線儀測量大鼠腰4、5椎體BMD，然后，在無菌條件下經(jīng)背側切除雙側卵巢組織，切除組織進行組織形態(tài)學檢查，確保切除組織為卵巢組織。術后將大鼠放回籠中自由活動，常規(guī)飼養(yǎng)。術后3個月，再次用雙能X線儀測量大鼠腰4、5椎體BMD，以確定骨質(zhì)疏松動物模型建立成功。將60只骨質(zhì)疏松大鼠隨機分為兩組，實驗組(SR治療組)和空白對照組，每組

3、30只。 2.大鼠OPF模型的建立：確定骨質(zhì)疏松動物模型建立成功后，兩組大鼠，用同樣的方法進行腹腔注射麻醉，麻醉效果滿意后，在無菌條件下，隨機選一側股骨，暴露股骨干，在股骨中段行橫行截骨，制作橫行骨折模型，然后用自制加鎖髓內(nèi)針固定，固定效果滿意后，逐層縫合傷口。術后將大鼠放回籠中，自由活動，常規(guī)飼養(yǎng)。 3.給藥方法和劑量：OPF術后第一天開始，實驗組每只大鼠按400 mg/(kg·d)SR灌胃，對照組給予同體積的生理鹽水

4、灌胃，共6周。 4.實驗觀察指標 4.1影像學觀察：OPF術后即刻、2、6周，用X線拍片機(美國GE公司)拍CR片，觀察加鎖髓內(nèi)針位置和骨折斷端愈合情況。 4.2組織學和免疫組織化學(BMP-2)觀察：OPF術后2和6周，每組隨機取5只大鼠，斷頸處死后取骨折處骨痂組織(含骨折斷端，長約3cm的骨組織)，6周時加取健側股骨干骺端，常規(guī)固定、脫水，石蠟包埋，切片，層厚5μm，HE染色和免疫組織化學染色后鏡檢。

5、 4.3骨組織形態(tài)計量學測量：用染好的OPF術后6周的健側股骨干骺端HE切片在Mimics圖像處理與分析系統(tǒng)中進行骨形態(tài)學指標骨小梁面積比，骨小梁平均寬度和骨小梁平均間隔的測量。 4.4BMD測量：OPF術后6周對兩組大鼠用雙能X線儀測量腰4、5椎體BMD。 4.5生物力學測量：OPF術后6周兩組大鼠取術側股骨，拔除加鎖髓內(nèi)針，采用Electro Force3200生物材料實驗儀行三點彎曲實驗。 結果：

6、1.影像學觀察結果：OPF術后即刻、2周X線檢查示，兩組股骨骨折斷端對位對線均良好，未見明顯差異。OPF術后6周X線顯示，實驗組骨折斷端骨痂較大，整條股骨骨膜下都有不同程度的骨痂形成，骨折線模糊，有連續(xù)骨痂通過骨折斷端；對照組骨折斷端骨痂較小，骨折線模糊，骨折斷端仍有透亮線存在。 2.組織學和免疫組織化學觀察結果：OPF術后2周時，組織學觀察未見明顯差異，免疫組織化學染色顯示實驗組BMP-2表達陽性細胞數(shù)高于對照組，差異有統(tǒng)計學

7、意義(P<0.01)。OPF術后6周，組織學顯示實驗組較對照組骨痂組織大，有較多的成熟軟骨細胞，纖維組織少，一些原始骨小梁開始向成熟骨小梁過渡，實驗組在組織學上比對照組愈合提前。OPF術后6周，實驗組BMP-2表達陽性細胞數(shù)仍高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 3.骨組織形態(tài)計量學測量：OPF術后6周時，實驗組骨小梁面積比和骨小梁平均寬度高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；骨小梁平均間隔小于對照組，差異有統(tǒng)

8、計學意義(P<0.01)。 4. BMD測量結果：OPF術后6周時，實驗組腰4、5椎體BMD高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 5.生物力學測量結果：OPF術后6周時，術側股骨三點彎曲實驗顯示，實驗組最大負荷、最大橈度高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。 結論： 1.SR有抑制骨質(zhì)吸收和促進骨形成的雙重作用。 2.SR能增加骨小梁數(shù)量，使骨小梁增粗，骨小梁間隙變窄，改善骨的顯