1、第一部分：
　　目的:以人源非小細(xì)胞肺癌A549、NCI-H1299細(xì)胞為腫瘤模型,通過體內(nèi)外實驗觀察PTD4-Apoptin融合蛋白對人源非小細(xì)胞肺癌的抑瘤效應(yīng)。
　　方法:PTD4-Apoptin融合蛋白處理體外培養(yǎng)的人源非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞A549、NCI-H1299和臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC,采用MTT法檢測細(xì)胞增殖、AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡;建立人源非小細(xì)胞肺癌A549異種移植瘤裸鼠模型,

2、采用PTD4-Apoptin融合蛋白瘤體皮膚表面涂抹方式治療荷瘤裸鼠,同時設(shè)涂抹PTD4-GFP蛋白和PBS對照組,觀察PTD4-Apoptin融合蛋白對A549荷瘤裸鼠腫瘤的生長抑制效果,HE染色觀察PTD4-Apoptin組裸鼠主要臟器病理形態(tài)改變。
　　結(jié)果:PTD4-Apoptin融合蛋白可抑制體外培養(yǎng)的A549和NCI-H1299細(xì)胞增殖并促使其凋亡,且呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。A549荷瘤裸鼠皮下瘤生長曲線顯示,融合蛋白涂抹

3、前治療組和對照組的腫瘤體積大小不存在差異,經(jīng)PTD4-Apoptin融合蛋白涂抹治療后,PTD4-Apoptin治療組裸鼠的腫瘤生長速度比對照組慢,治療21天后,治療組和對照組的瘤塊體積的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,PTD4-Apoptin治療組裸鼠主要臟器HE染色未見細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變。
　　結(jié)論:PTD4-Apoptin融合蛋白可以通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的方式抑制體外培養(yǎng)的人源非小細(xì)胞肺癌A549、NCI-H1299細(xì)胞的生長;PTD

4、4-Apoptin融合蛋白可抑制A549荷瘤裸鼠腫瘤的生長。
　　第二部分：
　　目的:探討注射靶向ADAM10的shRNA對鼠源宮頸癌細(xì)胞U14荷瘤小鼠腫瘤生長的影響。
　　方法:建立宮頸癌U14昆明小鼠荷瘤動物模型,采用癌旁注射的方式將pGenesil1-ADAM10shRNA表達載體注入小鼠體內(nèi),以注射載有ADAM10干擾片斷無意義序列HK的pGenesil4-HKshRNA和注射生理鹽水為對照。注射21天后處死

5、小鼠并剝離腫瘤,采用免疫組織化學(xué)染色法檢測U14荷瘤小鼠腫瘤組織中ADAM10蛋白的表達,繪制腫瘤生長曲線。
　　結(jié)果:注射pGenesil1-ADAM10shRNA質(zhì)粒組、注射pGenesil4-HKshRNA質(zhì)粒組和注射生理鹽水組腫瘤生長速度明顯不同,注射pGenesil4-HKshRNA質(zhì)粒和注射生理鹽水的對照組腫瘤生長速度明顯比實驗組快。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示注射pGenesil1-ADAM10shRNA質(zhì)粒的小鼠腫瘤組