1、鼻咽癌是東南亞和地中海地區(qū)常見的頭頸部惡性腫瘤，患者主要為中青年。鼻咽癌的首選療法為放射治療，即使結合順鉑化療，患者的5年生存率也僅為70％。因此，迄需研發(fā)新的治療方法。 本課題對重組IFN γ蛋白對鼻咽癌的抗腫瘤作用及其機制進行了研究。結果表明，鼻咽癌細胞株CNE-1、CNE-2與C666-1均表達有活性的IFN γ受體及其下游效應因子(Jak-1、Jak-2、Stat-1與IRF-1)。IFN γ可激活3株鼻咽癌細胞中的Ja

2、k-Stat信號通路，并以劑量與時間依賴性的方式抑制細胞的生長。IFN γ的抗增殖作用與G0/G1期阻滯和細胞凋亡相關。IFN γ誘導的G0/G1期阻滯與周期素依賴性蛋白激酶抑制蛋白p21、p27和/或p15的誘導，以及CDK4、CDK6與CDK2的下調有關。而工FN γ誘導的凋亡則有Bak上調、Bcl-X和/或Bcl-2下調、ICE家族分子(caspase-1、-3、-8、-9)激活的參與。以2 × 10<'6>IU/Kg/d的

3、劑量瘤內注射IFN γ，連續(xù)給藥21天，可顯著提高CNE-2、C666-1移植瘤小鼠的生存率(P<0.05)，抑瘤率分別達到47.8％和50％。這些結果表明，IFN γ可通過誘導GO/G1期阻滯和細胞凋亡直接抑制鼻咽癌細胞的增殖，并抑制鼻咽癌移植瘤的生長，因此，IFN Y治療有望成為鼻咽癌治療的新療法。重組IFN γ蛋白的臨床應用受到其半衰期短及毒副作用的限制，因此，我們構建了攜帶IFN γ基因的重組小環(huán)載體(minicircle-IF

4、N γ)，研究IFN γ基因治療在鼻咽癌治療中的應用。將minicircle-IFN γ及攜帶相同表達盒的母質粒p2ΦC31-IFN γ轉染293、NIH3T3、CNE-1、CNE-2與C666-1細胞，小環(huán)載體所介導的外源基因表達較p2①C31高19至102倍，而且可更有效的抑制CNE-1、CNE-2與C666-1的生長，將細胞的相對生長率分別降低至7．1％±1．6％、2．7％±1．0％與6．1％±1．6％。流式細胞檢測和caspas

5、e-3活性分析表明，IFN γ基因治療可通過誘導細胞G0/G1期阻滯和凋亡直接抑制鼻咽癌細胞的增殖。在CNE-2與C666-1移植瘤模型中，小環(huán)載體介導的瘤內基因表達較p2ΦC31-IFN γ高11至14倍，且表達可持續(xù)達21天。與p2ΦC31-IFN γ處理組小鼠相比，小環(huán)載體處理組小鼠的生存率顯著提高(P<0．05)，抑瘤率分別達到77．5％和83％。我們的研究表明，IFN γ基因治療可在體外直接抑制鼻咽癌細胞的增殖，并在體內抑制移