1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文維甲酸對實(shí)驗(yàn)性腦梗死后神經(jīng)顆粒素與生長相關(guān)蛋白43表達(dá)的影響專業(yè)名稱申請人指導(dǎo)教師答辯委員會主席答辯委員會委員神經(jīng)病學(xué)李揚(yáng)李玲教授教授教授教授教授中II『大學(xué)附屬第一醫(yī)院廣州I卑鏨鞍維甲酸對實(shí)驗(yàn)性腦梗死后神經(jīng)顆粒素與生長相關(guān)蛋自43表達(dá)的影晌系統(tǒng)的神經(jīng)元內(nèi)，在發(fā)育中的神經(jīng)元，GAP43伴隨著軸突的生長在神經(jīng)組織內(nèi)大量合成，在生長錐表達(dá)尤其豐富【111。成年時(shí)，大部分腦NGAP43表達(dá)水平較低，新皮質(zhì)、嗅球和海馬以及腦

2、干內(nèi)的單胺類神經(jīng)元GAP43mRNA直保持在較高水平。損傷時(shí)，這些區(qū)域的神經(jīng)元都表現(xiàn)為側(cè)枝出芽和反應(yīng)性軸突再生，并伴隨著GAP43表達(dá)增高【。這些都表明對于發(fā)育成熟的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，GAP43的表達(dá)是評估軸突損傷和再生反應(yīng)的一個重要指標(biāo)。維甲酸(retinoicacid，RA)是一種維生素A(VitaminA)的活性代謝產(chǎn)物。RA類物質(zhì)在生物體的胚胎發(fā)育、器官形成、生殖、細(xì)胞分化和維持正常的生理穩(wěn)態(tài)等方面都發(fā)揮著重要作用[1213l。這些

3、廣泛的生理作用是以I認(rèn)受體介導(dǎo)的，而這些存在于細(xì)胞核內(nèi)的受體可與特異的DNA區(qū)域結(jié)合，從而調(diào)節(jié)其鄰近的靶基因的表達(dá)，以此發(fā)揮IiA類物質(zhì)的瀑布式調(diào)節(jié)功能f14】。目前已知包括NRGNmRNA、GAP43mRNA在內(nèi)的100多種基因受RA信號調(diào)節(jié)[1415】。RA在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育過程起著非常重要的作用，在維持已發(fā)育成熟大腦的功能方面亦扮演著重要的角色【婚博】。研究目的本實(shí)驗(yàn)主要觀察，腦梗死后梗死灶周圍皮質(zhì)不同時(shí)間點(diǎn)NRGN、NRG

4、NmRNA及GAP43、GAP一43mRNA的動態(tài)表達(dá)情況；腹腔注射RA對實(shí)驗(yàn)性腦梗死后神經(jīng)功能恢復(fù)、梗死灶大小變化、腦梗死灶周圍NRGN與GAP43兩種重要的突觸再生反應(yīng)指標(biāo)表達(dá)的影響，試圖找到一種能促進(jìn)腦梗死后神經(jīng)再生、突觸重建的新方法，為臨床腦卒中患者的治療和康復(fù)提供可靠的理論依據(jù)。研究方法將體重280～3209雄性SD大鼠(SpmgueDawieyRats)216只，隨機(jī)分成：(1)假手術(shù)組，(2)皮層梗死組溶劑組，(3)皮層梗

5、死組維甲酸組，每組設(shè)有腦梗死后l天、3天、7天、14天、21天、2s天六個時(shí)間觀察點(diǎn)。用電凝法建立一側(cè)大腦中動脈皮層支閉塞(MCAO)模型，后兩組于術(shù)前12d時(shí)分別腹腔注射溶劑或維甲酸。MCAO術(shù)后每隔244“時(shí)注射一次，至斷頭取腦日，運(yùn)用神經(jīng)功能評分觀察各組大鼠各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)功能的恢復(fù)情況。斷頭取腦后行HE染色測定梗死灶大小，免疫組化檢測各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)NRGN、GAP43的表達(dá)情況，RealtimePCR檢測各組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)NRG