高糖環(huán)境損傷eNOS-Caveolin-1復(fù)合物影響骨髓內(nèi)皮祖細胞功能的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究高糖在體外對大鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞的功能的影響及其分子機制，為糖尿病外周血管病變提供新的治療靶點。
　　 方法：密度梯度離心法獲取大鼠骨髓單個核細胞，EGM-2培養(yǎng)，熒光顯微鏡鑒定內(nèi)皮祖細胞(EPCs)攝取Dil-ac-LDL，結(jié)合UEA-1lectin雙陽性，細胞免疫熒光VEGFR-2+，CD133+。收集貼壁細胞并加入不同濃度葡萄糖使培養(yǎng)液終濃度分別為11.1mmol/1、33.3mmol/l、55.5mmol/l

2、。觀察不同葡萄糖濃度下骨髓來源內(nèi)皮祖細胞的增殖、遷移和體外血管生成能力的變化，采用westernblot法檢測小凹蛋白Caveolin-1和eNOS蛋白水平的變化；RT-PCR檢測Caveolin-1和eNOS的RNA濃度的變化，NO檢測試劑盒檢測細胞培養(yǎng)基中NO的水平。
　　 結(jié)果：隨著培養(yǎng)液中葡萄糖濃度的增高，骨髓來源的EPCs的增殖、遷移、成血管能力都逐漸減弱。Caveolin-1mRNA和蛋白濃度逐漸上升；eNOSmRN

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