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文檔簡介
1、第一部分大鼠前列腺增生模型的制備及組織學(xué)評估
目的:建立一種效果可靠、操作簡單且周期短的大鼠前列腺增生模型,為進一步開展實驗奠定基礎(chǔ)。
方法:采用去勢后大鼠皮下注射丙酸睪酮4mg/kg/d的方法對大鼠進行前列腺增生模型的建立,通過對比不同造模時間前列腺大小及濕重、HE染色觀察前列腺上皮細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞的增生情況,來了解最佳的造模時間及模型的可靠程度。
結(jié)果:實驗組大鼠去勢并以4mg/kg/d 皮下
2、丙酸睪酮注射造模后,大鼠前列腺濕重與體積、前列腺指數(shù)均較對照組有明顯上升,以造模21天組與28天組最為顯著(P<0.001),21天組與28天組之間各數(shù)值無顯著性差異;HE 染色證實造模21天組與造模28天組均能良好的形成前列腺上皮與間質(zhì)增生模型。
結(jié)論:SD 大鼠去勢后皮下注射丙酸睪酮4mg/kg/d,連續(xù)注射21天,形成前列腺上皮細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞均明顯增生的模型。此法操作簡單,效果可靠,且建模所需時間較短,是一種良好的大
3、鼠前列腺增生模型制備方法。
第二部分不同劑量A 型肉毒毒素前列腺內(nèi)注射實驗及其組織學(xué)研究
目的:了解大鼠前列腺增生模型A 型肉毒毒素多點注射后的變化及其細(xì)胞凋亡情況。
方法:對建立好的前列腺增生模型大鼠前列腺內(nèi)多點注射不同劑量的A 型肉毒毒素,一周后收獲前列腺標(biāo)本,測量其濕重、體積,計算前列腺指數(shù),原位末端轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)了解其細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果:大鼠前列腺內(nèi)分別注射
4、不同劑量的肉毒毒素一周后,前列腺濕重及體積均明顯減小,以20U 肉毒毒素組最為明顯。TUNEL 檢測凋亡發(fā)現(xiàn),肉毒毒素注射后前列腺細(xì)胞出現(xiàn)大量凋亡,細(xì)胞凋亡率與肉毒毒素劑量呈正相關(guān)。20U 肉毒毒素注射組前列腺細(xì)胞的凋亡率高達(dá)(0.711±0.154),而對照組的細(xì)胞凋亡率僅為0.035±0.014,二者的差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)論:肉毒毒素多點注射后,可誘導(dǎo)前列腺細(xì)胞發(fā)生凋亡,使前列腺重量及體積減小。
第三部
5、分目的:通過免疫組織化學(xué)研究,了解大鼠前列腺內(nèi)肉毒毒素注射后激活細(xì)胞凋亡的可能原因。
方法:使用免疫組織化學(xué)技術(shù),對10U 肉毒毒素注射大鼠的前列腺進行免疫組織化學(xué)研究,了解凋亡相關(guān)基因的表達(dá)情況,探討肉毒毒素激活細(xì)胞凋亡的可能途徑。
結(jié)果:肉毒毒素注射后大鼠前列腺內(nèi),Bcl-2、Fas以及Caspase-3的表達(dá)均與前列腺增生組有顯著性差異。其中Fas 及Caspase-3的表達(dá)增加,而Bcl-2的表達(dá)減低
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