雙酶體系的共固定化及其動(dòng)力學(xué)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本文選取工業(yè)上較為常用、價(jià)格低廉的硅藻土和海藻酸鈣為載體分別用吸附法和包埋法共固定化α-淀粉酶和糖化酶雙酶體系。其方法簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便,成本低廉,更適合工業(yè)化大生產(chǎn)。 本文研究了雙酶比例和固定化條件對(duì)兩種共固定化酶反應(yīng)速率的影響。得到硅藻土共固定化雙酶體系的最佳共固定化條件為:載體(g)∶糖化酶(U)∶α-淀粉酶(U)=1∶100∶160;溫度為5℃-15℃;pH為4.5-5.5。海藻酸鈣共固定化雙酶體系的最佳共固定化條件為:海藻

2、酸鈉濃度為3%-4%,CaCl2濃度為2%;酶濃度為糖化酶20U/ml,α-淀粉酶24U/ml;糖化酶(U)∶α-淀粉酶(U)=1∶1.2;溫度為50℃-70℃;pH為4.0-5.5。并比較了兩種共固定化酶的熱穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性、儲(chǔ)藏穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性,得出兩種共固定化酶的最適反應(yīng)溫度分別為50℃-60℃(硅藻土)和55℃-65℃(海藻酸鈣);最適反應(yīng)pH均為5.0;其米氏常數(shù)Km為16.830mg/ml(硅藻土)和10.467mg/m

3、l(海藻酸鈣)。 而共固定化酶的動(dòng)力學(xué)研究以硅藻土共固定化酶為研究對(duì)象,是建立在游離雙酶協(xié)同水解淀粉動(dòng)力學(xué)和固定化酶在受產(chǎn)物抑制時(shí)的動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)上,并提出了共固定化酶的動(dòng)力學(xué)模型:協(xié)同作用階段α-淀粉酶的水解作用存在外擴(kuò)散阻力和內(nèi)擴(kuò)散阻力,而糖化酶僅受到內(nèi)擴(kuò)散阻力;協(xié)同作用結(jié)束后糖化酶的水解反應(yīng)同時(shí)受到外擴(kuò)散阻力和內(nèi)擴(kuò)散阻力的影響,并推導(dǎo)出其動(dòng)力學(xué)方程,通過實(shí)驗(yàn)結(jié)果和模擬計(jì)算結(jié)果的比較,兩者吻合的較好。該動(dòng)力學(xué)模型在一定范圍內(nèi)能較

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