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1、本文利用產(chǎn)朊假絲酵母(Candidautilis1422)和米曲霉(Aspergillusoryzae3042)進(jìn)行深層液體復(fù)合發(fā)酵產(chǎn)高蛋白質(zhì),主要是對(duì)產(chǎn)朊假絲酵母培養(yǎng),同時(shí)輔以米曲霉復(fù)合發(fā)酵豐富內(nèi)源酶系,所產(chǎn)酶系主要以產(chǎn)蛋白酶為主。利用內(nèi)源酶系對(duì)產(chǎn)朊假絲酵母進(jìn)行自溶,即得富含活性肽和多種游離氨基酸的飼用酵母提取物。 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn),確定產(chǎn)朊假絲酵母和米曲霉的復(fù)合發(fā)酵產(chǎn)蛋白質(zhì)最佳的培養(yǎng)基組成為:麥芽汁(200Bé)20
2、%,麩皮2%,牛肉膏2%,KH2PO40.3%,MgSO4·7H2O0.05%;產(chǎn)蛋白質(zhì)最適的工藝條件為:先接入米曲霉孢子懸液20%,搖床轉(zhuǎn)速為120r/min,30℃下培養(yǎng)48小時(shí),再接入產(chǎn)朊假絲酵母種子擴(kuò)培液10%,搖床轉(zhuǎn)速為180r/min,30℃下恒溫混合培養(yǎng)24小時(shí),共72小時(shí),結(jié)束培養(yǎng),裝液量100mL/500mL三角瓶,初始pH值6.5;在此條件下發(fā)酵,粗蛋白質(zhì)含量達(dá)到53.55%。 利用復(fù)合發(fā)酵內(nèi)源酶系對(duì)產(chǎn)朊假絲
3、酵母進(jìn)行自溶,研究了影響酵母自溶的因素與條件,試驗(yàn)結(jié)果表明,產(chǎn)朊假絲酵母的最佳自溶條件為:自溶時(shí)間32h,自溶促進(jìn)劑乙醇的濃度為1%,pH值為6.0,溫度為50℃。加水量50%(折算成酵母泥的加水量是200%)。在此條件下自溶,上清液中游離氨基酸的含量為20.01mg/100ml,四種呈味核苷酸含量分別為:鳥苷酸(G)=1.438μg/mL,肌苷酸(I)=1.259μg/mL,腺嘌呤核苷酸(A)=0.356μg/mL,胞嘧啶核苷酸(C)
4、=0.189μg/mL,并對(duì)其中肽分子量分布進(jìn)行了檢測(cè),得出肽的組成主要是8肽以下的肽,即為平常所說(shuō)的生物活性肽。 為了提高飼用酵母的誘食性,利用美拉德反應(yīng)改善了酵母提取物的風(fēng)味,以產(chǎn)朊假絲酵母自溶液為反應(yīng)基液,添加一定量的蝦粉,可以產(chǎn)生水產(chǎn)風(fēng)味的飼用酵母提取物,反應(yīng)物配比及反應(yīng)條件為:酵母自溶液50mL,D-(+)-木糖=2%,L-谷氨酸=1.0%,VB1=1%,蝦粉=10%,pH值在5.0-5.5之間,反應(yīng)溫度120℃,反應(yīng)
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