1、目的:該實驗研究旨在檢測AML在初治、化療緩解后、復(fù)發(fā)時MK基因與蛋白表達水平變化,明確其基因表達是否與蛋白表達平行;探討MK的表達水平與AML的FAB分型及預(yù)后的關(guān)系;檢測bcl-2基因表達水平,推斷其與MK表達的相關(guān)性,探討MK抗凋亡的機制;同時,檢測mdr-1基因表達水平,分析MK與白血病細胞耐藥的相關(guān)性.從而推斷MK在AML發(fā)生、發(fā)展中的作用及其作用機制,以期為成人急性白血病的臨床治療、判斷預(yù)后及轉(zhuǎn)歸提供新的思路.方法:應(yīng)用逆轉(zhuǎn)

2、錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法檢測65例急性髓系白血病(AML)患者(包括初治、復(fù)發(fā)和緩解期患者)、正常人的骨髓單個核細胞和髓系白血病細胞株K562和HL-60的MK、bcl-2、mdr-1 mRNA的表達水平;隨機選取部分患者和正常人,取骨髓分離單個核細胞,于RPMI1640培養(yǎng)基中孵育24小時,應(yīng)用蛋白印記(Western blot

3、)方法檢測培養(yǎng)細胞的MK蛋白表達,同時檢測髓系細胞株K562和HL-60中的MK蛋白表達,明確MK基因水平和蛋白水平是否表達一致,并觀察MK與白血病細胞凋亡和臨床耐藥的關(guān)系.結(jié)論:1.在AML患者中,MK的基因水平與蛋白水平表達一致.2.在初治或復(fù)發(fā)的AML患者中,MK表達增高與AML的FAB分型無明確相關(guān)性.3.AML患者MK與mdr-1表達無統(tǒng)計學(xué)意義上的相關(guān)性,MK對AML患者治療敏感性的影響與mdr-1介導(dǎo)的經(jīng)典耐藥途徑不同.4