1、第一部分
　　 目的：提高對T大顆粒淋巴細胞白血病(T LGLL)的認識。
　　 方法：回顧性分析我院2000年2月~2009年11月間確診的59例T LGLL患者病例資料。
　　 結果：T LGLL起病潛隱、進展緩慢，中位確診年齡50歲。貧血相關癥狀最為突出，40.7％患者脾臟輕中度腫大，13.6％患者肝臟輕度腫大。1例患者合并類風濕性關節(jié)炎。外周血細胞計數(shù)中性粒細胞<<1.5x109/L者占66.1％<0.5

2、x109/L者占13.6％048例患者貧血，中位血紅蛋白65g/L，合并純紅細胞再生障礙性貧血(PRCA)都1例，占53.4％。外周血大顆粒淋巴細胞(LGL)絕對值中位數(shù)1.64x10911，大多數(shù)(62.0％)患者LGL數(shù).OX109/Lo48例(81.3％)患者LGL免疫表型為CD3+CD8+CD57+CD56'o48例患者接受治療，治療總有效率87.5％，完全血液學緩解(HCR)者占60.4％e33例患者接受環(huán)抱素為主的治療，有效

3、率為81.8％ HCR率60.6％。復發(fā)率35.7％，主要由藥物減量、停藥或感染所致。中位隨訪時間20個月((3.5-120月)。
　　 結論：T LGLL起病及進展緩慢，主要表現(xiàn)血細胞減少和脾臟腫大，常合并PRCA。外周血LGL計數(shù)多<2.0X109/L，免疫表型以CD3+CD8+CD57+為主。治療有效率高，對以環(huán)抱素為主的免疫抑制治療方案反應良好。
　　 第二部分
　　 目的:通過基因轉導研究小鼠IFN-γ

4、在造血調節(jié)中的作用。
　　 方法:從小鼠脾臟細胞中提取mRNA RT-PCR方法擴增mIFN-γ片段，連接到pCDHI-MCSI-EF1-copGFP(pCDH-GFP)載體上，構建小鼠IFN-y(mIFN-γ)慢病毒表達載體pCDH1-mIFN-γ-EF1-copGFP( pCDH-mIFN-γ-GFP)。通過磷酸鈣沉淀法轉染293T細胞，分別制備帶有pCDH-mIFN-γ-GFP和pCDH-GFP空載體的慢病毒，感染C57小

5、鼠的骨髓單個核細胞(BMMNC)，48小時后進行甲基纖維素集落培養(yǎng)，觀察BMMNC集落形成能力，并將轉導后的BMMNC尾靜脈注射至致死劑量照射的受體C57小鼠體內，定期尾靜脈取血檢查血象，并用流式細胞儀檢測外周血細胞GFP陽性率。另外，取小鼠骨髓基質細胞培養(yǎng)傳代，用慢病毒感染后經尾靜脈注射至正常C57小鼠體內，定期檢測血象。
　　 結果:用帶有pCDH-mIFN-γ-GFP或空載體pCDH的病毒感染293T細胞，檢測病毒滴度分別

6、為4.5 x1 OS/ml和3.4X l Os/ml。經ELISA方法檢測上清液中mIFN-γ含量約為188pg/ml，證實感染的細胞中有mIFN-γ的表達。慢病毒感染后的C57小鼠BMMNG.集落培養(yǎng)結果顯示:感染mIFN-γ的BMMNC集落生成數(shù)量較空載體對照組顯著減少，提示轉導mIFN-γ可能直接損傷造血前體細胞，導致其集落形成能力下降。接受骨髓移植的C57小鼠2周后尾靜脈血象顯示:轉導mIFN-γ組的小鼠血象恢復較對照組晚，提示

7、mIFN-y可能通過損傷早期造血細胞導致造血恢復延遲。流式細胞儀檢測結果顯示:移植后8周外周血中仍可見GFP陽性細胞，表明轉導的細胞在小鼠體內可存活8周以上。移植了經病毒感染的小鼠骨髓基質細胞后的小鼠，2周開始尾靜脈取血查血象，至血象出現(xiàn)下降時處死小鼠，取骨髓組織送病理檢查。該部分實驗結果較少，有待完善。
　　 綜上所述，本研究通過慢病毒轉導mIFN-γ至小鼠BMMNC中，發(fā)現(xiàn)不僅造血細胞體外集落形成受抑制，而且移植小鼠骨髓造血