脂肪基質(zhì)血管成分促進(jìn)隨意皮瓣血管化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、背景:皮瓣是整形外科手術(shù)中的一項(xiàng)基本技術(shù),常用來修復(fù)因創(chuàng)傷、腫瘤等引起的組織缺損。皮瓣遠(yuǎn)端的缺血壞死仍是困擾臨床醫(yī)生的難題。如果能在術(shù)前實(shí)現(xiàn)皮瓣的血管化,則有望大大降低其壞死率。
   目的:本課題將脂肪中的基質(zhì)血管成分應(yīng)用于隨意皮瓣的缺血治療中,觀察其是否可以有效的提高皮瓣的血管化,從而提高皮瓣成活率,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)支持。
   方法:⑴以膠原酶消化脂肪得到基質(zhì)血管成分;利用密度梯度離心法分離骨髓中的單個(gè)核細(xì)胞。

2、DiI標(biāo)記后,以5×107的濃度重懸于1mlPBS中待移植。⑵于大鼠背部設(shè)計(jì)一10cm×3cm大小的矩形皮瓣,將基質(zhì)血管成分和骨髓中的單個(gè)核細(xì)胞移植至皮瓣的皮下組織層,PBS移植作為對照組。2天后,皮瓣掀開原位縫合。⑶術(shù)后7天進(jìn)行下列檢測:統(tǒng)計(jì)皮瓣的成活面積,激光血流灌注成像儀監(jiān)測皮瓣的血流;取各組皮瓣相同部位的組織,固定包埋后行HE染色,統(tǒng)計(jì)10個(gè)100×視野下毛細(xì)血管的數(shù)量,求其平均密度;冰凍切片后,熒光顯微鏡觀察移植的SVF是否成

3、活。連續(xù)切片行HE染色,觀察移植的SVF是否出現(xiàn)于血管結(jié)構(gòu)中;用ELISA試劑盒檢測各組皮瓣組織中內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)蛋白的表達(dá)量。
   結(jié)果:①SVF組和BM-MNCs組皮瓣的成活面積(分別為72.2±2.0%、
   76.4±3.1%)明顯大于對照組(56.8 4.6%),P<0.05。SVF組和BM-MNCs組皮瓣的血流灌注強(qiáng)度和范圍明顯高于對照組。②SVF組和BM-

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