香菇中真菌毒素的篩查及發(fā)生規(guī)律研究.pdf_第1頁(yè)
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1、香菇(Lentinula edodes)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富、味道鮮美,被人們譽(yù)為“菇中之王”、“天然的保健食品”、“植物性食品的頂峰”、“上帝的食品”等稱號(hào),深受廣大消費(fèi)者的青睞。但是香菇在栽培過(guò)程中處于溫暖潮濕的環(huán)境中,特別容易受真菌污染。真菌污染除了造成香菇產(chǎn)量損失外,更嚴(yán)重的是能產(chǎn)生對(duì)人畜有毒害作用的真菌毒素從而導(dǎo)致人們對(duì)香菇產(chǎn)品質(zhì)量安全的擔(dān)憂。因此,香菇中真菌毒素污染是影響其質(zhì)量安全的重要問(wèn)題。本文首先建立香菇中真菌毒素的檢測(cè)方法,對(duì)

2、香菇樣品進(jìn)行真菌毒素的篩查,同時(shí),通過(guò)對(duì)病害香菇進(jìn)行病原菌的分離與鑒定,了解香菇被真菌污染的情況,預(yù)測(cè)可能產(chǎn)生真菌毒素的真菌,最后對(duì)產(chǎn)毒真菌進(jìn)行產(chǎn)毒規(guī)律研究。為控制香菇中真菌毒素的污染提供理論參考,從而確保香菇產(chǎn)品質(zhì)量的安全。
  本實(shí)驗(yàn)研究成果主要?dú)w結(jié)為以下三個(gè)方面:
  1.以菇棚病態(tài)香菇、菌棒和市場(chǎng)上的晾干香菇為試驗(yàn)樣本,從病菇中分離主要污染真菌,從而確定香菇中主要污染真菌的菌群,并對(duì)真菌的產(chǎn)毒表型進(jìn)行分析。結(jié)果表明:

3、香菇從栽培到貯藏整個(gè)過(guò)程中污染真菌的種類,主要有哈茨木霉、茄腐鐮刀菌、黑曲霉和黑附球菌等。通過(guò)純培養(yǎng)特征、微觀形態(tài)特征、回接感染驗(yàn)證及分子鑒定,確定主要污染真菌的種類為11種。
  2.本研究針對(duì)香菇基質(zhì),建立了33種真菌毒素LC-MS/MS檢測(cè)方法,并對(duì)香菇樣品進(jìn)行了真菌毒素篩查,查找在香菇中可能存在的真菌毒素。結(jié)果表明:前處理方法采用了不需要進(jìn)一步凈化的簡(jiǎn)單、便宜、快速、有效的QuEChERS方法,色譜柱為Agilent Po

4、roshell120 EC-C18柱(100 mmt Poroshell1),采用線性梯度洗脫,流動(dòng)相為(A)醋酸銨水溶液和(B)甲醇。方法驗(yàn)證線性(R2≥0.9990),靈敏度(LOQ≤19μg/kg),回收率(73.6-117.9%)和準(zhǔn)確度(0.8%-18.3%),此方法成功應(yīng)用于檢測(cè)香菇中的多種真菌毒素。30個(gè)香菇樣本進(jìn)行篩查,共檢測(cè)到4種真菌毒素,濃度從3.3到28819.5μg/kg,為產(chǎn)毒菌株的預(yù)測(cè)提供了依據(jù)。
  

5、3.從香菇中分離得到11株鐮刀菌,且都為茄腐鐮刀菌,通過(guò)對(duì)來(lái)源不同的茄腐鐮刀菌在不同基質(zhì)中隨時(shí)間的產(chǎn)毒規(guī)律進(jìn)行探究。結(jié)果發(fā)現(xiàn):一,三株分離于香菇的茄腐鐮刀在玉米培養(yǎng)基中產(chǎn)生鐮刀菌酸(FA)和伏馬毒素(FB1和FB2),在大米和香菇中只產(chǎn)生 FB,與對(duì)照菌株相比茄腐鐮刀菌在大米和玉米培養(yǎng)基中產(chǎn)毒量很低,在香菇培養(yǎng)基中產(chǎn)毒量較高,而對(duì)照菌株產(chǎn)毒卻受到抑制。隨時(shí)間的變化,茄腐鐮刀菌在大米培養(yǎng)基和香菇中產(chǎn)毒有顯著差異(P<0.05);在玉米培養(yǎng)

6、基中產(chǎn)毒無(wú)顯著差異(P>0.05)。二,三株分別分離于香菇、青椒、玉米的茄腐鐮刀菌在不同培養(yǎng)基中隨時(shí)間的產(chǎn)毒規(guī)律研究發(fā)現(xiàn):在大米培養(yǎng)基中,分離于香菇和青椒的菌株不產(chǎn)生 FA,只產(chǎn)生 FB,隨時(shí)間變化產(chǎn)毒量有顯著差異(P<0.05);分離于玉米的菌株不產(chǎn) FA,只產(chǎn) FB,隨時(shí)間的變化產(chǎn)毒量無(wú)顯著差異(P>0.05)。在玉米培養(yǎng)基中,分離于香菇、玉米、青椒的菌株產(chǎn)生 FA和FB,隨時(shí)間的變化產(chǎn)毒量無(wú)顯著差異(P>0.05),三株菌株產(chǎn)毒總

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