1、本試驗以地被石竹(Dianthus chinese)為試驗材料，將從擬南芥(Arabidopsis)中獲得的CBF1基因通過農(nóng)桿菌(Agrohacterium)介導的葉盤法進行了遺傳轉(zhuǎn)化，并對其進行了PCR檢測，獲得了4個轉(zhuǎn)基因株系。同時，對轉(zhuǎn)基因植株的抗寒性——經(jīng)低溫脅迫，離體葉片的相對電導率、游離脯氨酸含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶的活性進行了初步的評價。以期獲得抗寒性得到提高的轉(zhuǎn)基因地被石竹。 主要研究結(jié)果如下：

2、 1．對于獲得的28個抗性株系進行了PCR檢測，其中4個株系的DNA經(jīng)擴增后產(chǎn)生了與陽性對照相同的特異擴增條帶，其片段大小約為640bp。這初步表明外源基因已整合進地被石竹轉(zhuǎn)化植株的基因組中。 2．經(jīng)低溫脅迫后，隨著溫度的下降，葉片相對電導率呈“S”型上升趨勢，轉(zhuǎn)基因株系比對照株系(CK)的相對電導率在各溫度下均較低；-20℃時對照株系的相對電導率的上升幅度最大，達到505.03％，而轉(zhuǎn)基因株系27的上升幅度最小，為439.84

3、％。-16℃時，CK與株系27差異極顯著，CK與株系18差異顯著；-20℃下，CK與株系27差異極顯著，與株系12、18差異顯著。 3．對照植株在低溫脅迫下，隨著溫度不斷下降，脯氨酸含量上升幅度最大，達到了975.35％;各轉(zhuǎn)基因株系12、18、25、27的脯氨酸含量上升幅度均小于對照株系，分別為823.01％、747.59％、568.59％和531.28％，轉(zhuǎn)基因株系27最小。在各低溫處理下，轉(zhuǎn)基因株系27的脯氨酸含量比對照株

4、系高出50％～200％。從-4℃到-16℃，各株系脯氨酸含量增幅都較大，均在100％左右，到-20℃時，增幅有所減小，降低到50％左右。 4．經(jīng)過不同低溫處理后，各株系的丙二醛含量均有所增加。從0℃到-20℃，對照株系的丙二醛含量的增加量，各溫度下分別為80.23％，12.14％，40.7％，39％以及33.42％，-4℃時增幅較大，其他溫度下增幅比較平緩。轉(zhuǎn)基因各株系在各溫度下丙二醛的增長量相對較平緩，特別是從-8℃開始增長量