1、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)是指排除酒精和其它明確的損肝因素所致的以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征。NAFLD包括一系列相互聯系的病理改變，包括單純性脂肪肝及由其演變的脂肪性肝炎(nonalcoholicsteato-hepatitis，NASH)和脂肪性肝硬化三種類型。NAFLD是2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2D

2、M)、胰島素抵抗(insulin resistant，IR)和肥胖的一種較為常見的肝臟并發(fā)癥。據資料顯示2.6％正常體重兒童、52.8％肥胖兒童都有NAFL，NASH在人群中的發(fā)病率也已經達到2％-3％。近來的研究表明單純性脂肪肝預后良好，而近一半的NASH患者可發(fā)展至肝纖維化，約15％發(fā)展至肝硬化，3％進展至肝衰竭。但是NAFLD發(fā)生發(fā)展的分子機制尚未完全明確。
　　本實驗通過高脂喂養(yǎng)，在低密度脂蛋白缺失(LDLR-/-)小鼠的

3、基礎上建立了NAFLD模型。分別于小鼠3周齡時喂養(yǎng)高脂飲食(HFD)和標準飲食(ND)，并于3、6、10、14和18周齡，解剖取材，應用實時定量RT-PCR技術檢測高脂喂養(yǎng)小鼠與普通喂養(yǎng)小鼠肝臟脂代謝相關基因表達差異，并進行血生化指標檢測及肝臟形態(tài)學觀察。探討脂代謝相關基因在LDLR-/-小鼠肝脂肪變性形成和發(fā)展中的作用，結果如下:
　?、傺笜藱z測:與ND小鼠相比，HFD喂養(yǎng)小鼠6周齡時表現為體重增加、胰島素水平升高和IR增

4、強，并持續(xù)至18周齡。HFD喂養(yǎng)小鼠血糖在18周齡時顯著升高，達T2DM標準。該組小鼠血清中的血清總膽固醇(total cholesterol，TC)、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol，HDL-C)含量于6周齡時較ND喂養(yǎng)小鼠明顯

5、升高，并持續(xù)升高至18周齡。肝功能指標血清丙氨酸氨基轉移酶(alanine amino transferase，ALT)及天門冬氨酸氨基轉移酶(aspartate amino transferase，AST)分別從10周齡和14周齡時顯著升高(P＜0.05)，持續(xù)升高至18周齡。從6周齡時HFD小鼠肝臟FFA含量較ND組小鼠顯著升高，并持續(xù)至18周齡。10周齡開始HFD小鼠肝臟TG含量較ND組小鼠顯著升高，持續(xù)至18周齡。
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6、肝臟病理形態(tài)檢測:油紅O染色顯示，HFD喂養(yǎng)組小鼠6和10周齡時肝細胞質內出現大小不等的脂滴，呈現肝脂肪變性。14和18周齡時肝臟脂肪變性程度明顯加重。各年齡段的ND喂養(yǎng)小鼠肝臟組織結構完整，小葉結構清晰，肝細胞內均未觀察到明顯的脂質沉積。
　　③基因表達變化特征:與ND喂養(yǎng)小鼠相比，HFD喂養(yǎng)小鼠脂代謝調控因子轉錄因子肝X受體α(liver X receptorα，LXRα)、SREBP1c、糖原合酶激酶(glycogen sy

7、nthase kinase，GSK3β)及生脂基因乙酰輔酶A羧化酶α(acetyl CoA carboxylaseα，ACCα)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase，FAS)和硬脂酰基輔酶A脫氫酶1(Stearoyl-CoA desaturase-1，SCD-1)、乙酰輔酶A羧化酶β(acetyl CoA carboxylaseβ，ACCβ)和磷酸甘油酯酰轉移酶(glycerol phosphate acyltransf