莪術(shù)醇誘導(dǎo)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的: 通過(guò)檢測(cè)莪術(shù)醇處理的胃癌SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制率,細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,DNA變化,以及凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達(dá),探討莪術(shù)醇對(duì)胃癌SGC-7901細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用,初步闡明莪術(shù)醇的抗腫瘤機(jī)制,為莪術(shù)醇抗腫瘤的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究對(duì)象: 胃癌SGC-7901細(xì)胞株。 方法: 將莪術(shù)醇溶于無(wú)水乙醇,初始濃度為5mg/mL。設(shè)實(shí)驗(yàn)組A、B、C、D組,按比例濃度配制的12.5、2

2、5、50、100μg/mL莪術(shù)醇培養(yǎng)基,并以含1%無(wú)水乙醇培養(yǎng)基為陰性對(duì)照組E。采用MTT法和alamarblue法檢測(cè)12.5-100μg/mL四種不同濃度莪術(shù)醇作用SGC-7901細(xì)胞24、48、72h后細(xì)胞增殖的抑制率;采用AO/EB熒光染色法觀(guān)察莪術(shù)醇處理SGC-7901細(xì)胞24、48、72h后細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;采用PI標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)莪術(shù)醇處理SGC-7901細(xì)胞24、48h的凋亡率;采用WesternBlot檢測(cè)莪術(shù)醇

3、處理SGC-7901細(xì)胞24、48h后凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達(dá)。 結(jié)果: 1、MTT法檢測(cè)提示:12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以抑制細(xì)胞增殖,莪術(shù)醇對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)(除了12.5μg/mL莪術(shù)醇處理SGC-7901細(xì)胞24、48、72h,三個(gè)時(shí)間段的抑制率之間無(wú)顯著性差異(P>0.05))而逐漸增強(qiáng),加藥組的抑制率與對(duì)照組比較,有顯著性差異(P<0.05)。 2、alam

4、arblue法檢測(cè)提示:12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以抑制細(xì)胞增殖,莪術(shù)醇對(duì)細(xì)胞增殖的抑制作用隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)(除了12.5μg/mL莪術(shù)醇處理SGC-7901細(xì)胞24、48、72h,三個(gè)時(shí)間段的抑制率之間無(wú)顯著性差異(P>0.05))而逐漸增強(qiáng),加藥組抑制率與對(duì)照組比較,有顯著性差異(P<0.05)。 3、AO/EB熒光染色法觀(guān)察:12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以誘導(dǎo)SGC-7901細(xì)胞凋亡,莪術(shù)醇處理

5、細(xì)胞24、48、72h,凋亡細(xì)胞數(shù)隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)(除了12.5μg/mL莪術(shù)醇處理SGC-7901細(xì)胞24、48、72h,三個(gè)時(shí)間段的凋亡率之間無(wú)顯著性差異(P>0.05))而逐漸增多,加藥組的凋亡率與對(duì)照組比較,有顯著性差異(P<0.05)。 4、流式細(xì)胞術(shù)顯示:12.5-100μg/mL莪術(shù)醇促進(jìn)SGC-7901細(xì)胞凋亡,莪術(shù)醇作用SGC-7901細(xì)胞24、48h,凋亡率隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸增

6、高,加藥組的凋亡率與對(duì)照組比較,有顯著性差異(P<0.05)。 5、WesternBlot結(jié)果顯示:12.5-100μg/mL莪術(shù)醇可以降低SGC-7901細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá),莪術(shù)醇處理SGC-7901細(xì)胞24、48h,Bcl-2蛋白表達(dá)的相對(duì)含量隨莪術(shù)醇濃度增加和作用時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸降低,加藥組與對(duì)照組Bcl-2蛋白表達(dá)的相對(duì)含量比較,有顯著性差異(P<0.05)。 結(jié)論: 1、濃度為12.5-100μg/

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