1、1.研究意義 該課題從PCR衍生技術和寡核苷酸芯片技術兩條途徑入手,旨在提出問題,發(fā)現(xiàn)問題,改進技術,完善技術.2.研究方法 該研究一方面應用基于PCR的衍生技術進行SNPs檢測,以耐藥基因SHV中SNPs的檢測為靶標,對檢測方法的可行性、實驗條件的最佳化和改良進行探討,建立行之有效的檢測條件.3.研究成果 3.1基于PCR衍生技術的SNPs檢測技術 3.1.1 建立以耐藥基因SHV中SNPs的檢測的研究靶標,尤其構建其兩個亞型的克隆,

2、為各種實驗方法的評價提供已知模板,便于對檢測方法優(yōu)化和檢測結果的分析.3.1.2 提出在SSP-PCR的引物設計中,建議在特異性引物3'末端2~4位引入錯配堿基比不引入錯配能更好地提高對SNPs等位基因的分辨能力,使最佳退火溫度范圍加大,檢測條件更易于優(yōu)化.3.2 基于寡核苷酸芯片的SNPs檢測技術 3.2.1 建立了HLA-A、HLA-B多態(tài)性SNPs檢測的寡核苷酸芯片研究平臺,構建HLA標準等位基因庫,便于對探針設計、樣品制備、雜交