1、該實(shí)驗(yàn)以系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)為對(duì)象,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及PLISA法,在體外細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)體系中,通過(guò)與地塞米松相對(duì)照,分別從細(xì)胞及分子水平探討了新型免疫抑制劑霉酚酸酯(mycophenolate mofetil,MMF)對(duì)SLE患者炎性細(xì)胞釋放、Th細(xì)胞亞群比例改變及PBMCs凋亡的作用,以分析MMF對(duì)SLE療效作用的特點(diǎn)和機(jī)理.首先,分離S

2、LE患者的PBMCs,分別加MPA(為MMF在體內(nèi)的活性形式)或地塞米松刺激培養(yǎng),用ABC-ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)上清中IL-10、IL-12、IFN-γ、sFas及sFasL的水平,用三色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞中CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'->T細(xì)胞、CD4<'+>IFN-γ<'->IL-10<'+>T細(xì)胞及CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'+>T細(xì)胞百分率,并用AV-FITC/PI雙標(biāo)記法檢測(cè)PBMCs的

3、凋亡百分率.DEX除同樣可使SLE患者PBMCs培養(yǎng)中CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'->T細(xì)胞亞群(Th1)比例降低及凋亡增加外,與MPA的作用尚存有差異:DEX使IL-10的分泌增加,并使CD4<'+>IFN-γ<'+>IL-10<'+>T細(xì)胞亞群比例升高;DEX誘導(dǎo)SLE PBMCs凋亡的程度較MPA更顯著.MPA與DEX均能抑制sFas、sFasL的水平,提示MPA與DEX的誘導(dǎo)PBMCs凋亡的機(jī)制可能不是通過(guò)Fa

4、s-FasL途徑.因?yàn)?一般情況下,Fas/FasL高表達(dá)時(shí),往往伴隨sFas/sFasL水平增高.,但sFas、sFasL的作用不同,sFasL能夠作用于膜Fas,誘導(dǎo)凋亡;而sFas則能與sFasL或膜FasL結(jié)合,抑制凋亡.故DEX對(duì)sFas分泌的抑制作用較為明顯,與其顯著地凋亡誘導(dǎo)作用是相一致的.總之,MPA及DEX對(duì)SLE患者Th亞群及PBMCs凋亡的作用既有相同,又存在差異,從而為臨床上聯(lián)合應(yīng)用二藥以達(dá)到優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),從而更好地