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文檔簡介
1、目的:
為卵巢癌紫杉醇耐藥機制的研究提供與之相關(guān)蛋白質(zhì)的信息及其生物功能。探討HMGB1與卵巢癌紫杉醇耐藥的相關(guān)性及其在卵巢癌紫杉醇耐藥中的可能作用機制,為卵巢癌紫杉醇耐藥機制的研究提供新線索和一定的實驗依據(jù)。
方法:
在前期研究中我們采用蛋白質(zhì)組學方法對卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株和敏感細胞株的總蛋白進行分析,找到了24個差異表達蛋白。本研究首先應用生物信息學將蛋白質(zhì)組學所獲得的這些差異表達蛋白的信
2、息進行歸納、整合,運用BinGO軟件進行檢索、分析,從而篩選并預測這些差異表達蛋白的功能。然后選擇其中一個因子HMGB1蛋白為目的蛋白,采用蛋白免疫印跡法和細胞免疫熒光法檢測HMGB1蛋白在卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株和敏感細胞株中的表達水平和細胞內(nèi)的定位。
結(jié)果:
1、通過生物信息學,建立了24個差異表達蛋白相互作用蛋白的分子網(wǎng)絡;BinGO分析結(jié)果顯示24個差異表達蛋白參與了多種細胞過程,且這些差異蛋白在糖代謝
3、和調(diào)控凋亡方面表現(xiàn)為富集現(xiàn)象;進一步從調(diào)控凋亡方面研究耐藥,發(fā)現(xiàn)HMGB1、PHB、ANXA1、HSPB1、SFN等幾個蛋白與凋亡關(guān)系密切。
2、蛋白免疫印跡法結(jié)果顯示HMGB1在卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株(SKOV3/Taxol-25)和敏感細胞株(SKOV3)中均有表達,且在SKOV3/Taxol-25中表達更高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3、細胞免疫熒光法結(jié)果顯示HMGB1蛋白在卵巢癌紫杉醇耐藥細
4、胞株(SKOV3/Taxol-25)和敏感細胞株(SKOV3)的胞漿、胞核中均有不同程度表達,但在耐藥細胞株(SKOV3/Taxol-25)中的陽性表達率更高,差異有顯著性(P<0.01);并且耐藥細胞株(SKOV3/Taxol-25)細胞胞漿的陽性表達率也高于敏感細胞株(SKOV3)細胞胞漿的陽性表達率,差異有顯著性(P<0.01)。
結(jié)論:
1、本實驗為卵巢癌紫杉醇耐藥機制的研究提供了大量生物信息,篩選了
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