1、慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是具有氣流受限特征的疾病,氣流受限不完全可逆、呈進行性發(fā)展.其中,支氣管、細支氣管壁和肺間質(zhì)的纖維性變發(fā)揮了重要作用.作為世界第四大致死疾病,研究COPD的發(fā)病機制對疾病的防治有著重要意義.結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)是新近發(fā)現(xiàn)的一種早期即刻基因家族成員,可促進細胞增殖及細

2、胞外基質(zhì)(ECM)沉積,參與多種纖維化性疾病的發(fā)生與進展.本研究通過對CTGF在COPD大鼠模型中表達變化的研究,以期探討CTGF在COPD發(fā)病中的作用.第一部分COPD大鼠模型建立及形態(tài)學(xué)分析目的:通過煙薰及氣道內(nèi)注射脂多糖法復(fù)制COPD大鼠模型并進行形態(tài)學(xué)分析,以觀察研究COPD形成過程及氣道重塑的變化.方法:通過煙熏及氣管內(nèi)注入脂多糖方法建立COPD大鼠模型.按吸煙天數(shù)不同,將50只大鼠隨機分為0 d組(對照組)、7 d組、14

3、d組、21 d組和28 d組.各組大鼠肺組織均進行天狼猩紅染色;測定肺組織破壞指數(shù)(destructive index,DI)和肺泡平均截距(mean linear intercept,Lm).結(jié)果:21d組和28d組大鼠肺組織Ⅰ型與Ⅲ型膠原明顯增多(P<0.05).與對照組相比,14d組、21d組和28d組大鼠肺組織的DI顯著增高(P<0.05);21d組、28d組Lm顯著增加(P<0.05).DI的改變早于Lm的變化.結(jié)論:煙薰及氣

4、道內(nèi)注射脂多糖法能成功復(fù)制出COPD大鼠模型.COPD的形成過程中伴隨著肺間質(zhì)纖維化,肺泡的破壞可能先于肺泡腔大小的變化.第二部分慢性阻塞性肺病大鼠結(jié)締組織生長因子表達的實驗研究目的:研究CTGF在COPD表達變化以及與肺結(jié)構(gòu)重塑的相關(guān)性.方法:通過煙熏及氣管內(nèi)注入脂多糖方法建立COPD大鼠模型,按吸煙天數(shù)不同,將50只大鼠隨機分為0 d組(對照組)、7 d組、14 d組、21 d組和28 d組.以正常大鼠為對照組.逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-

5、PCR)檢測肺組織與支氣管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)CTGF mRNA表達,免疫組織化學(xué)染色法測定肺組織CTGF蛋白表達.結(jié)果:肺泡灌洗液與肺組織CTGF mRNA均在第7d才開始表達,表達峰出現(xiàn)在14 d(P<0.05),21d~28d維持在一高水平.對照組及7d組肺組織CTGF蛋白未表達,第14天開始表達,28天表達最強(P<0.05).CTGF蛋白表達與COPD形態(tài)學(xué)改變(DI