1、環(huán)境響應(yīng)性聚合物成為近年來(lái)藥劑學(xué)領(lǐng)域研究較為熱門的新型靶向藥物遞送載體,其能在一定程度上模擬生物響應(yīng)行為,隨外部環(huán)境的微小變化而改變自身性能,使藥物更為有效地遞送至靶區(qū),從而提高藥物療效并降低毒副作用。本研究根據(jù)腫瘤部位微環(huán)境特點(diǎn),構(gòu)建環(huán)境pH敏感性聚乙二醇化殼聚糖硬脂酸嫁接物膠束給藥系統(tǒng)。以嫁接物膠束的聚乙二醇修飾,大幅度減少正常細(xì)胞對(duì)嫁接物膠束的攝取,并延長(zhǎng)體內(nèi)循環(huán)時(shí)間,提高嫁接物膠束的腫瘤組織靶向分布;以嫁接物膠束與聚乙二醇之間的

2、pH敏感性橋鏈在腫瘤組織較低pH環(huán)境條件下的斷裂,獲得嫁接物膠束的腫瘤細(xì)胞高效攝取,以期實(shí)現(xiàn)抗腫瘤藥物的安全高效治療。
　　 本研究以18.0Kda的低分子量殼聚糖為原料,以碳二亞胺為偶合劑,合成殼聚糖-硬脂酸嫁接物(stearicacidgraftedchitosan,CS)。核磁共振氫譜確證嫁接物結(jié)構(gòu),三硝基苯磺酸法測(cè)定其硬脂酸修飾比例為5.9％。CS聚合物在水性介質(zhì)中能自聚集形成膠束,芘熒光法測(cè)定其臨界膠束濃度為129.6

3、μg/mL。由粒徑電位儀測(cè)得1.0mg/mL的CS膠束溶液的數(shù)均粒徑為27.6±1.8nm,表面電位為39.7±1.6mV。
　　 以碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺為催化劑,順烏頭酸為pH敏感性橋鏈,在CS嫁接物上鍵合聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG),合成環(huán)境pH敏感性PEG化糖脂嫁接物(pH-sensitivePEGylatedstearicacidgraftedchitosan,PCCS);同時(shí)通過(guò)席夫

4、反應(yīng)在CS上直接鍵合PEG合成非環(huán)境pH敏感性PEG化糖脂嫁接物(pH-insensitivePEGylatedstearicacidgraftedchitosan,PCS),作為非pH敏感性嫁接物對(duì)照。分別考察PCS和PCCS的理化性質(zhì)。經(jīng)PEG修飾后,嫁接物的臨界膠束濃度增大,膠束的數(shù)均粒徑增大而表面電位有所降低.體外釋放結(jié)果呈現(xiàn)出PCCS具有pH敏感性降解行為,釋放介質(zhì)的pH越低,PEG的斷鏈越快。細(xì)胞定量攝取結(jié)果顯示,PEG修飾

5、后膠束在正常肝細(xì)胞(BRL-3A)上的攝取顯著降低,而在肝癌細(xì)胞(BEL-7402)上,PCCS的細(xì)胞攝取隨pH的降低略有增加,顯示其作為抗腫瘤藥物遞送載體的潛在優(yōu)越性。
　　 以阿霉素(doxorubicin,DOX)為模型藥物,超聲-透析法制各CS,PCS,PCCS載藥膠束(CS/DOX,PCS/DOX,PCCS/DOX)。三種膠束的載藥能力相當(dāng),包封率都在86%以上。粒徑測(cè)定結(jié)果顯示載藥膠束的數(shù)均粒徑均較各自的空白膠束有所

6、減小。體外釋放結(jié)果顯示,PEG修飾減緩了載藥膠束的藥物釋放,且PCCS/DOX具有pn觸發(fā)的藥物釋放行為,釋放介質(zhì)的pH越低,藥物的釋放越快。以BEL-7402為腫瘤細(xì)胞模型,體外考察載藥膠束的細(xì)胞毒性及攝取情況,結(jié)果表明PCCS/DOX的細(xì)胞攝取能力和細(xì)胞藥效均優(yōu)于PCS/DOX。
　　 動(dòng)物活體組織分布結(jié)果顯示,PCCS攜帶示蹤染料在腫瘤組織有大量聚集。動(dòng)物體內(nèi)藥效結(jié)果顯示,PCCS/DOX給藥系統(tǒng)在維持藥效的同時(shí),能夠提高