BCG對人外周血來源樹突狀細(xì)胞miRNA表達(dá)譜的影響及其初步驗證.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、結(jié)核分枝桿菌是典型的胞內(nèi)寄生菌,主要靶細(xì)胞是巨噬細(xì)胞,但樹突狀細(xì)胞能顯著激活初始型T細(xì)胞,啟動T細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng),是細(xì)胞免疫反應(yīng)的重要啟動者。MicroRNAs作為一類18-22 nt的小分子,其調(diào)控作用廣泛存在真核生物的各個進(jìn)程,而且在免疫方面尤為重要,本研究采用miRNA芯片明晰BCG感染前后DCs中miRNA表達(dá)譜的變化,以發(fā)現(xiàn)可能參與DCs調(diào)控結(jié)核分枝桿菌感染相關(guān)miRNA,并采用Real time PCR進(jìn)行初步驗證,為闡明D

2、Cs抗結(jié)核分枝桿菌的特異性miRNA調(diào)控機制奠定基礎(chǔ)。
   1、成功分離并培養(yǎng)出健康人外周血來源的樹突狀細(xì)胞,經(jīng)過BCG感染DCs前后MicroRNA芯片檢測,顯示miRNA表達(dá)譜的差異,上調(diào)的有hsa-miR-1270;hsa-miR-147b;hsa-miR-3201;hsa-miR-132;hsa-miR-3611;hsa-miR-155;hsa-miR-1973;hsa-miR-934;hsa-miR-106b*等30

3、個,下調(diào)的有hsa-miR-27b;hsa-miR-151-5p;hsa-miR-374c;hsa-miR-425;hsa-miR-125b;hsa-miR-361-5p;hsa-miR-320c;hsa-miR-130a等32個,這些miRNA可能在DCs抗結(jié)核分枝桿菌的感染中起著重要的作用。
   2、成功采用頸環(huán)引物捕捉成熟miRNA,并反轉(zhuǎn)錄成cDNA,構(gòu)建了T載體,采用絕對定量對其中的4個miRNA分子進(jìn)行了Real

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