Fibrillin轉基因油菜的再生及其光合特性的檢測.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Fibrillin是一類由核基因編碼,與質體相關的脂連接蛋白,廣泛存在于單子葉和雙子葉植物中。在逆境條件下,如強光、寒冷和干旱環(huán)境,該類蛋白大量積累,說明Fibrillin在生物脅迫下發(fā)揮重要功能。在擬南芥中已發(fā)現(xiàn)Fibrillin是.ABl2(ABA insensitive)相互作用蛋白質,其合成也依賴于ABI1,而ABI1和ABI2是脫落酸(ABA)信號傳導過程中的關鍵因子,推測Fibrillin作為負調控因子,參與到ABA信號傳導

2、途徑。同時Fibrillin與油質體相關,強光下對光合系統(tǒng)Ⅱ有保護作用,推測該基因在油菜中的過量表達可能百利于提高油菜的抗逆能力和產油量。因此研究Fibrillin在油菜中的表達具有重要的理論意義和實踐意義。 本實驗把Fibrillin操縱子(帶有葡萄糖苷酶GUS報告基因)和Fibrillin cDNA分別連接到pBll21質粒上,采用根癌農桿菌共培養(yǎng)的方法,以帶有1—2mm子葉柄的完整子葉為轉化受體,將連有35S啟動子和NPT

3、 Ⅱ標記基因的Fibrillin cDNA導入甘藍型油菜主要栽培品種“2005南系中”,獲得抗卡那霉素的轉基因植株,沒有得到含F(xiàn)ibrillin操縱子的轉基因植株。在實驗中,根據材料的特點,優(yōu)化了預培養(yǎng)、農桿菌浸染、共培養(yǎng)、誘導愈傷、誘導芽、生根等組織培養(yǎng)的各個步驟。對部分經卡那霉素篩選得到的再生植株進行PCR檢測,目前有來自3個株系的植株表現(xiàn)為陽性,初步證實外源基因已整合到植物細胞基因組中。將轉基因植株煉苗后移入大田,在3月初到4月末

4、油菜開花結果期間,對葉片和角果分別進行光合指標和熒光指標的檢測以及產量性狀的分析,發(fā)現(xiàn)轉基因植株和非轉基因植株之間存在明顯差異。針對Fibrillin啟動子,我們將繼續(xù)優(yōu)化條件,以期得到轉基因成株苗,然后通過組織化學方法(如GuS染色),檢測Fibrillin定位在植株的哪些器官組織進行特異性表達。由于Fibrillin與油質體相關,籃增強植物對外界環(huán)境的適應能力,保護光合系統(tǒng)Ⅱ,因此,該基因在油菜中的表達可能有利于提高油菜光合效率、抗

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