離果山羊草殺配子染色體3C的甲基化水平研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本研究分別以普通小麥中國(guó)春(CS)、中國(guó)春-3CSAT3CSAT殺配子染色體二體附加系(CS-3CSAT3CSAT)、中國(guó)春-3C3C殺配子染色體二體附加系(CS-3C3C)三種小麥為材料。在細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)中,分別100μmol/L濃度的5-氮胞苷(5-AC)對(duì)三種小麥材料進(jìn)行處理,對(duì)后期末期染色體的畸變率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。取三種小麥品系的花藥對(duì)其進(jìn)行DNA甲基化水平的檢測(cè)。將甲基化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中所得出的與甲基化有關(guān)的差異帶進(jìn)行回收、克隆、測(cè)序及序列分

2、析。主要研究結(jié)果如下:
  1.5-氮胞苷處理對(duì)小麥根尖的細(xì)胞學(xué)影響:
  未經(jīng)過(guò)去甲基化處理的普通小麥 CS中及殺配子染色體二體附加系中都沒(méi)有大量的染色體畸變的出現(xiàn),而經(jīng)過(guò)100μmol/L濃度的5-AC處理后殺配子染色體二體附加系小麥的根尖出現(xiàn)了大量的染色體斷裂、落后染色體、染色體橋和微核等畸變形式,在不含殺配子染色體的普通小麥 CS中則不產(chǎn)生上述的畸變形式。且CS-3C3C的畸變率幾乎為CS-3CSAT3CSAT的兩倍

3、。
  2.甲基化敏感擴(kuò)增多態(tài)性法對(duì)小麥甲基化水平的檢測(cè)
  通過(guò)MSAP技術(shù)檢測(cè)到花藥時(shí)期的殺配子染色體二體附加系CCGG位點(diǎn)的甲基化水平均高于普通小麥,與普通小麥相比殺配子染色體雙體附加系的CCGG位點(diǎn)上發(fā)生了明顯的甲基化模式變異,其中以CNG位點(diǎn)的升高為主。
  3.殺配子染色體甲基化變異位點(diǎn)的序列分析
  測(cè)序結(jié)果顯示,殺配子染色體二體附加系與普通小麥CS相比,甲基化發(fā)生變異的位點(diǎn)主要涉及到轉(zhuǎn)座子及蛋白功

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