1、目的:
　　粘附因子被認為是尿路致病性大腸埃希菌(Uropathogenic Escherichia coli，UPEC)最重要的毒力因子，粘附因子可以使其在泌尿系統(tǒng)各器官上皮細胞發(fā)生粘附、定植甚至侵入，導致泌尿系感染的反復發(fā)作。本研究以UPEC臨床分離株為研究對象，對同一患者的大腸埃希菌（Escherichia coli,E.coli）的尿便分離株的同源性進行分析，分析同源的E.coli攜帶的fimH序列，明確其與相應的氨基酸序

2、列變化情況;對UPEC粘附因子相關基因攜帶率進行調(diào)查，并比較其之間差異，從基因水平初步探討粘附因子與泌尿系感染之間的相關性。
　　材料與方法:
　　1、收集本院2009-2012年臨床診斷為泌尿系感染的門診和住院患者清潔中段尿培養(yǎng)分離的大腸埃希菌，以及2012年本院門診泌尿系感染患者的尿便來源的大腸埃希菌。
　　2、采用K-B紙片擴散法測定大腸埃希菌（尿和便標本分離的所有菌株）對三類五種抗菌藥物（氨芐西林、環(huán)丙沙星、頭

3、孢噻肟、頭孢哌酮、慶大霉素）的敏感性。根據(jù)大腸埃希菌藥敏表型對菌株進行初步分型。
　　3、使用脈沖場凝膠電泳(PFGE)對同一患者尿便來源菌株的同源性進行分析。
　　4、PCR方法擴增大腸埃希菌粘附因子相關基因，對同一患者尿便來源fimH陽性菌株的PCR擴增產(chǎn)物測序結果進行對比分析，并將其序列翻譯成相應的氨基酸序列進行比對。
　　結果:
　　1、共收集89株UPEC，70株來自反復發(fā)作性尿路感染患者，19株來自急

4、性單純性膀胱炎患者。9名門診泌尿系感染患者首日就診時的尿便標本同時進行培養(yǎng)分離的E.coli。
　　2、9例患者中5例患者各自尿便分離的E.coli存在相同的藥敏表現(xiàn)類型，其余4例尿便分離E.coli無藥敏表型一致者。
　　3、同一患者尿便分離的E.coli藥敏表型一致的菌株在PFGE圖譜上具有相同的條帶數(shù)，且相應條帶大小相同，為同一克隆株。而同一患者尿便分離的E.coli藥敏表型不一致者，其不一致的條帶數(shù)大于7，菌株之間無

5、相關性。
　　4、序列分析結果顯示，同一患者PFGE分型相同的尿便來源E.coli的fimH基因序列對比具有高度同源性(＞99.9％)，而同一患者PFGE分型不同的尿便來源E.coli fimH基因序列則分別存在7處的堿基變化，第79位(T-A)、第129位(T-C)、第157位(G-A)、第298位(A-T)、第640位(C-A)、第701位(T-C)、第817位(T-C)。其中第129位(T-C)、第157位(G-A)、第29

6、8位(A-T)、第701位(T-C)和第817位(T-C)的改變導致了氨基酸第43位精氨酸(Arg)被半胱氨酸(Cys)取代，第53位甘氨酸(Gly)被精氨酸(Arg)取代，第100位異亮氨酸(Ile)被苯丙氨酸(Phe)取代，第234位和第273位半胱氨酸(Cys)被精氨酸(Arg)取代。
　　5、89株UPEC中Ⅰ型菌毛粘附因子相關基因fimH陽性率為91％(81/89)，反復發(fā)作性尿路感染組91.4％(64/70)與急性單純

7、性膀胱炎組89.4％(17/19)之間差異無統(tǒng)計學意義;afaC基因陽性率為71.9％(64/89)，兩組之間(57/70 vs7/19)差異有統(tǒng)計學意義;Ag43相關基因flu檢出率為67.4％，且反復發(fā)作尿路感染組flu陽性率明顯高于急性單純性膀胱炎組，P=0.013;P菌毛與S菌毛在本院收集菌株中檢出率均低，分別為23.5％、6.7％，組間無差異。
　　結論:
　　1、抗生素藥敏譜分型與PFGE分型證明，部分引起泌尿系