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1、目的:探討砷中毒對(duì)大鼠空腸形態(tài)結(jié)構(gòu)及巨噬細(xì)胞標(biāo)記物(CD68)、白介素-2(IL-2)、CD8、表皮生長(zhǎng)因子(Epidermal Growth Factor,EGF)、神經(jīng)降壓素(Neurotensin,NT)陽(yáng)性細(xì)胞的影響。
方法:將60只清潔級(jí)SD大鼠分為對(duì)照組(0.0 mg/kg)、低砷組(0.4 mg/kg)、高砷組(10.0 mg/kg),分別自由飲用As2O3與蒸餾水配制的染毒水溶液,連續(xù)染毒4個(gè)月。采用氫化物發(fā)生
2、電感耦合等離子發(fā)射光譜法測(cè)定尿砷、血砷的含量,HE染色、PAS反應(yīng)觀察染砷組大鼠空腸一般形態(tài)結(jié)構(gòu)變化,免疫組化SABC法顯示CD68、IL-2、CD8、EGF、NT陽(yáng)性細(xì)胞,Biomias圖象分析軟件檢測(cè)空腸杯狀細(xì)胞數(shù)及平均灰度值、CD68、IL-2、CD8、EGF、NT陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及平均灰度值,應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
結(jié)果:1.對(duì)照組大鼠進(jìn)食飲水正常,毛發(fā)光澤,精神狀態(tài)良好;染砷組大鼠毛發(fā)粗糙,精神萎靡
3、,易激惹,體重降低。2.高、低劑量染砷組大鼠尿砷、血砷濃度明顯高于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.HE染色觀察,染砷組大鼠空腸部分絨毛不整齊,固有層內(nèi)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。4. PAS反應(yīng)觀察,杯狀細(xì)胞數(shù)目增多,高、低劑量染砷組杯狀細(xì)胞計(jì)數(shù)高于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組大鼠杯狀細(xì)胞灰度值比較,高、低劑量染砷組杯狀細(xì)胞平均灰度值低于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。5.免疫組織化學(xué) SABC法顯示:①三組大鼠
4、空腸 CD68陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較,高、低劑量染砷組 CD68陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)高于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組大鼠CD68陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值比較,高、低劑量染砷組 CD68陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值低于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。②三組大鼠空腸IL-2陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較,與對(duì)照組相比,低劑量染砷組IL-2陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)增高,高劑量染砷組IL-2陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)降低,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組大鼠IL-2陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值比
5、較,與對(duì)照組相比,低劑量染砷組 IL-2陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值降低,高劑量染砷組 IL-2陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值增高,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③三組大鼠空腸CD8陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較,高、低劑量染砷組CD8陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)高于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組大鼠CD8陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值比較,高、低劑量染砷組CD8陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值低于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。④三組大鼠空腸 EGF陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較,高、低劑量染砷組 E
6、GF陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)高于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組大鼠EGF陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值比較,高、低劑量染砷組EGF陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值低于對(duì)照組,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。⑤三組大鼠空腸NT陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)比較,與對(duì)照組相比,低劑量染砷組NT陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)增高、高劑量染砷組NT陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)降低,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。三組大鼠 NT陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值比較,與對(duì)照組相比,低劑量染砷組 NT陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值降低,高劑量染砷組
7、NT陽(yáng)性細(xì)胞平均灰度值增高,p<0.05,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:1、砷可致大鼠空腸結(jié)構(gòu)損傷:空腸部分絨毛不整齊,炎性細(xì)胞增多,杯狀細(xì)胞數(shù)目增多及平均灰度值降低。2、砷可致大鼠空腸內(nèi) CD68、CD8、 EGF陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)增多,CD68、CD8、EGF表達(dá)增強(qiáng),與砷染毒劑量呈正相關(guān)。3、低劑量砷可致大鼠空腸IL-2、NT陽(yáng)性細(xì)胞計(jì)數(shù)增多,IL-2、NT表達(dá)增強(qiáng),與砷染毒劑量呈正相關(guān);高劑量砷可致大鼠空腸IL-2、NT陽(yáng)性細(xì)胞
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