1、研究背景:阿薩希毛孢子菌作為常見病原真菌（白念珠菌、煙曲霉、隱球菌）之外的又一個(gè)重要的毒力較強(qiáng)的條件致病性真菌，播散性毛孢子菌感染的病死率高達(dá)50-80％。臨床及實(shí)驗(yàn)室研究表明唑類藥物具有較好的體內(nèi)外抗阿薩希毛孢子菌活性，但隨著臨床唑類藥物（特別是氟康唑）的廣泛使用，其對唑類藥物耐藥的報(bào)道逐漸增多。
　　目的:尋找阿薩希毛孢子菌敏感株與相應(yīng)氟康唑誘導(dǎo)耐藥株在氟康唑作用前后的差異蛋白，探尋該菌對氟康唑耐藥的可能機(jī)制。
　　材料

2、與方法:
　　1.選取氟康唑敏感的臨床株(CBS2479、CBS8904)進(jìn)行氟康唑體外誘導(dǎo)耐藥，獲得耐藥表型穩(wěn)定的耐藥株2479R、8904R;
　　2.iTRAQ多重化學(xué)標(biāo)記-LC-MS質(zhì)譜分析CBS2479和2479R，CBS8904和8904R在氟康唑作用前后蛋白表達(dá)差異;
　　3.應(yīng)用生物信息學(xué)分析手段，對得到的蛋白質(zhì)組學(xué)研究數(shù)據(jù)結(jié)果，從蛋白質(zhì)功能、通路及網(wǎng)絡(luò)層面篩選耐藥相關(guān)（細(xì)胞膜、離子通道、酶活性等功能）

3、差異蛋白質(zhì);
　　4根據(jù)生物信息學(xué)分析的結(jié)果，綜合文獻(xiàn)分析，推測與阿薩希毛孢子菌唑類耐藥機(jī)制可能相關(guān)的差異蛋白。
　　結(jié)果:
　　1.體外誘導(dǎo)獲得阿薩希毛孢子菌穩(wěn)定氟康唑耐藥株;
　　2.iTRAQ多重化學(xué)標(biāo)記-LC-MS質(zhì)譜分析得到CBS2479組質(zhì)譜，鑒定分析出77320個(gè)質(zhì)譜，其中肽段30682個(gè)，唯一肽段26847，以及7174個(gè)蛋白點(diǎn);CBS8904組質(zhì)譜，鑒定分析出35653個(gè)質(zhì)譜，其中肽段12746

4、個(gè)，唯一肽段12022，以及4585個(gè)蛋白點(diǎn);
　　3.CBS8904組生物信息學(xué)分析結(jié)果:以1.5倍作為差異表達(dá)蛋白質(zhì)篩選的條件，CBS8904與誘導(dǎo)耐藥菌株8904R相比，差異表達(dá)蛋白68個(gè)，其中上調(diào)及下調(diào)蛋白各34個(gè);CBS8904氟康唑作用后發(fā)現(xiàn)，差異表達(dá)蛋白33個(gè)，上調(diào)蛋白9個(gè)，下調(diào)蛋白24個(gè);CBS8904和8904R在氟康唑作用后差異表達(dá)蛋白38個(gè)，上調(diào)蛋白31個(gè)，下調(diào)蛋白7個(gè);其中參與類固醇代謝的蛋白Erg2、Er

5、g4、Erg5、Erg7、Erg11、Erg26，參與細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白Ste12、TOR1、DDR48、HSP70與Calcineurin相關(guān)蛋白與阿薩希毛孢子菌的耐藥機(jī)制相關(guān)。
　　4.CBS2479組生物信息學(xué)分析結(jié)果:以以1.5倍作為差異表達(dá)蛋白質(zhì)篩選的條件，CBS2479與誘導(dǎo)耐藥菌株2479R相比，差異表達(dá)蛋白167個(gè)，其中上調(diào)蛋白91個(gè)，下調(diào)蛋白個(gè);CBS2479氟康唑作用后，差異表達(dá)蛋白55個(gè)，上調(diào)蛋白32個(gè)，下調(diào)蛋

6、白23個(gè);CBS2479和2479R在氟康唑作用后差異表達(dá)蛋白159個(gè)，上調(diào)蛋白78個(gè)，下調(diào)蛋白81個(gè);其中參與類固醇代謝的蛋白Erg4、Erg5、Erg6、Erg7、Erg11、Erg25、Frg26，細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白DDR48、calcineurin相關(guān)蛋白、HSP與阿薩希毛孢子菌的耐藥機(jī)制相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.體外誘導(dǎo)阿薩希毛孢子菌可以獲得穩(wěn)定的阿薩希毛孢子菌耐藥株，并用于阿薩希毛孢子菌的耐藥研究;
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