1、【目的】
　　探討TLR9在系統(tǒng)性紅斑狼瘡伴動脈粥樣硬化小鼠中對腎臟損傷的作用。
　　【方法】
　　本實驗室將降植烷腹腔注射進ApoE-/-小鼠，誘導建立系統(tǒng)性紅斑狼瘡伴動脈粥樣硬化小鼠模型；并在此基礎上腹腔注射 TLR9抑制劑 IRS869進行干預后，檢測血清中的抗ds-DNA抗體水平和腎臟組織中的IgG、補體C3、TLR9及TLR9通路分子和VEGF表達水平。
　　ApoE-/-C57BL/6小鼠和C57BL

2、/6小鼠隨機分為6組：C57BL/6+生理鹽水對照組（A組），ApoE-/-+生理鹽水對照組（B組），C57BL/6+降植烷組（C組），ApoE-/-+降植烷組（D組），C57BL/6+降植烷+IRS869組（E組），ApoE-/-+降植烷+IRS869組（F組）。高脂飲食喂養(yǎng)12周，處死動物。取血清進行ELISA檢測抗ds-DNA；取腎臟組織提取蛋白和RNA分別進行 Western Blot和Real-time PCR檢測TLR9及下

3、游信號通路分子和VEGF表達情況；取腎臟組織進行石蠟包埋，免疫熒光檢測IgG和補體C3，Massion染色檢測腎臟組織纖維化程度。
　　【結果】
　　1.免疫效應指標
　　1.1血清抗ds-DNA抗體水平
　?。?）降植烷組血清抗 ds-DNA抗體水平較 C57BL/6對照組明顯升高（P<0.05），ApoE-/-降植烷組相較 ApoE-/-對照組明顯升高（P<0.05），ApoE-/-降植烷組與C57BL/6降

4、植烷組差異沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　?。?）降植烷+IRS869組相較降植烷組明顯下降（P<0.05），ApoE-/-降植烷+IRS869組較ApoE-/-降植烷組明顯下降（P<0.05）。
　　1.2腎臟免疫熒光情況
　?。?）直接免疫熒光顯示降植烷組、ApoE-/-降植烷組 IgG在腎小球系膜毛細血管袢成明顯連續(xù)性分布，對照組偶爾可見散在顆粒狀分布，定量分析降植烷組相對于 C57BL/6對照組、ApoE-

5、/-降植烷組相對于 ApoE-/-對照組有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；間接免疫熒光顯示降植烷組、ApoE-/-降植烷組補體C3在腎小球系膜毛細血管袢成明顯顆粒狀分布，對照組偶爾可見散在顆粒狀分布，定量分析降植烷組相對于C57BL/6對照組、ApoE-/-降植烷組相對于ApoE-/-對照組有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　?。?）注射 TLR9抑制劑后降植烷+IRS869組、ApoE-/-降植烷+IRS869組分別相對于降植烷組、A

6、poE-/-降植烷組，在腎小球系膜毛細血管袢上，IgG和補體C3均明顯減少，定量分析差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　2.TLR9信號通路各分子表達
　　2.1腎臟TLR9及下游信號通路分子蛋白水平表達情況
　?。?）Western-blot分析，降植烷組、ApoE-/-降植烷組TLR9、MyD88、NF-κB相對對照組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；ApoE-/-降植烷組TLR9、MyD88、N

7、F-κB蛋白水平相對于降植烷組相對升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　?。?）降植烷+IRS869組、ApoE-/-降植烷+IRS869組TLR9、MyD88、NF-κB的蛋白水平比降植烷組、ApoE-/-降植烷組明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而與對照組相比無明顯變化，差異沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　2.2腎臟TLR9及下游信號通路分子cDNA水平表達情況
　?。?）PCR分析，降植

8、烷組TLR9、NF-κB、IRF7、Ⅰ型IFN的cDNA水平比C57BL/6對照組有升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；ApoE-/-降植烷組TLR9、MyD88、NF-κB、IRF7、Ⅰ型IFN的cDNA水平比對照組均有明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；而ApoE-/-降植烷組相對于降植烷組在TLR9、MyD88、NF-κB有明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　（2）PCR分析，降植烷+IRS8

9、69組、ApoE-/-降植烷+IRS869組TLR9、MyD88、NF-κB、IRF7、Ⅰ型IFN cDNA水平相對降植烷組、ApoE-/-降植烷組明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　　3.腎臟纖維化情況
　　3.1腎臟Massion情況
　?。?）降植烷組、ApoE-/-降植烷組腎臟腎小球膠原纖維相對于對照組明顯增多，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），ApoE-/-降植烷組相對于降植烷組纖維化程度也有

10、所升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　?。?）降植烷+IRS869組、ApoE-/-降植烷+IRS869組腎臟腎小球膠原纖維相對于降植烷組、ApoE-/-降植烷組明顯減少，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），和對照組相比沒有明顯差異（P>0.05）。
　　3.2 VEGF蛋白水平表達情況
　　（1）Western-blot分析，降植烷組、ApoE-/-降植烷組VEGF相對對照組明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P

11、<0.05）。ApoE-/-降植烷組相對于降植烷組升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。
　?。?）降植烷+IRS869組、ApoE-/-降植烷+IRS869組VEGF的蛋白水平比降植烷組、ApoE-/-降植烷組明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而與對照組相比無明顯變化，差異沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　【結論】
　　1.降植烷能誘導ApoE-/-小鼠產(chǎn)生抗ds-DNA抗體，降植烷能與ApoE基