1、目的:基因啟動(dòng)子CpG島的甲基化常常會(huì)導(dǎo)致基因的靜默,在胰腺癌中也發(fā)生基因的異常甲基化,導(dǎo)致一些抑癌基因的靜默。DNA甲基化抑制劑能夠逆轉(zhuǎn)異常轉(zhuǎn)變的靜默基因,使靜默的抑癌基因重新表達(dá),從而發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)。目前已研究發(fā)現(xiàn)幾種甲基轉(zhuǎn)移酶抑制物,其中5-氮雜-2-脫氧胞苷(5-Aza-CdR)具有較好的甲基轉(zhuǎn)移酶抑制效應(yīng)。本文的目的是研究甲基化抑制物5-氮雜-2-脫氧胞苷(5-Aza-CdR)干預(yù)對(duì)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1生物學(xué)行為的影響,并

2、探討其發(fā)揮作用的機(jī)制及胰腺癌治療中的應(yīng)用前景。
　　方法:用不同濃度的5-Aza-CdR處理Panc-1細(xì)胞株72h后,采用MTT比色法檢測(cè)干預(yù)前后細(xì)胞增殖活性的變化,流式細(xì)胞術(shù)(FCM)法檢測(cè)干預(yù)前后細(xì)胞凋亡率的變化,caspase-3活性測(cè)定檢測(cè)5-Aza-CdR誘導(dǎo)凋亡的能力。劃痕遷移試驗(yàn)和transwell小室法觀察干預(yù)前后細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的改變,免疫熒光染色法檢測(cè)干預(yù)前后細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)的表達(dá)。

3、>　　結(jié)果:經(jīng)5-Aza-CdR干預(yù)后,與對(duì)照組相比,PANC-細(xì)胞增殖活性明顯受到抑制,細(xì)胞凋亡率明顯提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),并且呈劑量依賴關(guān)系。而且Panc-1細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯減弱,細(xì)胞內(nèi)MMP-2的表達(dá)降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),并呈劑量依賴關(guān)系。
　　結(jié)論:5-Aza—CdR可以明顯抑制胰腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1的生長(zhǎng)增殖,并誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。同時(shí)可以抑制胰腺癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力,機(jī)制可能是