1、 目的：1. 研究腦出血(ICH)后繼發(fā)性腦損害及其機制；2.通過觀察烏司他丁(UTI)在ICH后對氧自由基、炎性反應(yīng)、腦水腫、腦組織病理損害及細胞凋亡的影響來探討UTI對繼發(fā)性腦損傷的保護作用及其機制；3.為臨床應(yīng)用UTI治療ICH提供理論及實驗依據(jù)。方法：1.分組：將雄性SD大鼠(n=90)隨機分為3組即UTI治療組(n=30)、ICH對照組(n=30)和假手術(shù)組(n=30),再將每組分為12h、1d、2d、3d、7d及14d6個

2、時間點,每個時間點5只大鼠。2.造模：ICH對照組和UTI治療組均采用立體定向技術(shù)把50ul自體不凝血注入大鼠右側(cè)尾狀核制作ICH模型,假手術(shù)組的手術(shù)操作與其他兩組相同,但不向尾狀核內(nèi)注血,留針時間超過10分鐘。3.給藥：ICH對照組和假手術(shù)組術(shù)后每天腹腔注射生理鹽水1ml, UTI治療組在術(shù)后予UTI50000u/kg.d加入1ml生理鹽水腹腔注射,直到相應(yīng)時間點。4.觀察：在術(shù)后各時間點對各觀察指標進行測定,采用Garcia方法進行

3、神經(jīng)功能障礙評分,干濕法測定腦組織含水量,放射免疫法測定IL-1β、IL-6及TNF-α含量,黃嘌呤氧化酶法測定SOD活性,硫代巴比妥酸法測定MDA含量,HE染色病理切片觀察血腫周圍腦組織病理改變, TUNEL原位染色法測定細胞凋亡,計數(shù)陽性細胞。5.采用SPSS17.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。結(jié)果：1. 與假手術(shù)組比較,ICH對照組神經(jīng)功能障礙評分在12h-14d明顯降低,血腫周圍腦組織含水量在1d-7d明顯增高, SOD活性在12h-7

4、d明顯降低, MDA含量在1d-7d明顯增高,IL-1β含量在12h-3d明顯增高, IL-6含量在1d-7d明顯增高, TNF-α含量在12h-3d明顯增高(P<0.05)；與假手術(shù)組比較,UTI治療組神經(jīng)功能障礙評分在12h-7d明顯降低,血腫周圍腦組織含水量在1d-3d明顯增高, SOD活性在1d-3d明顯降低,MDA含量在1d-7d明顯增高, IL-1β在12h-3d明顯增高,IL-6含量在1d-3d明顯增高,TNF-α含量在1

5、d-2d明顯增高(P<0.05)；與ICH對照組比較,UTI治療組神經(jīng)功能障礙評分在2d-7d明顯增高,血腫周圍腦組織含水量在1d-7d明顯降低,SOD活性在1d-3d明顯增高, MDA含量在1d-7d明顯降低,IL-1β含量在2d-3d明顯降低, IL-6含量在2d-3d明顯降低,TNF-α含量在1d-2d明顯降低(P<0.05)；2.ICH對照組12h可見血腫周圍輕度腦水腫,細胞間隙稍增寬,少量炎性細胞浸潤；1d可見神經(jīng)細胞輕度腫脹

6、,神經(jīng)元排列紊亂,數(shù)目較前減少,并可見炎性細胞浸潤；2d可見大量炎性細胞浸潤,以中性粒細胞浸潤為主,神經(jīng)細胞高度水腫,呈空泡樣變,尼氏體消失,胞核固縮、濃染。3d時血腫周圍高度腦水腫,有大量炎性細胞浸潤,可見部分神經(jīng)元變性壞死,細胞核結(jié)構(gòu)變模糊,可見膠質(zhì)細胞增生,血腫周圍可見吞噬含鐵血黃素的小膠質(zhì)細胞。7d可見血腫明顯縮小,以膠質(zhì)細胞增生為主。14d主要是膠質(zhì)細胞增生和血管增生。UTI治療組1d-7d的腦組織水腫和炎性細胞浸潤的程度及后

7、期的膠質(zhì)細胞增生均低于ICH對照組。3. 假手術(shù)組可見少量TUNEL染色陽性細胞表達；與假手術(shù)組相比較,ICH對照組和UTI治療組在各個時間點的TUNEL染色陽性細胞數(shù)均顯著增高(P<0.05),ICH組増高更明顯,在1d~14d與UTI治療組的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；ICH對照組和UTI治療組在12h即可見大量TUNEL染色陽性細胞表達,且3d達到高峰。4.直線相關(guān)分析：ICH對照組和UTI治療組的各時間點,神經(jīng)功能障礙評分

8、與腦組織含水量、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量及細胞凋亡均呈明顯負相關(guān),與SOD活性呈明顯正相關(guān)(P<0.05)；而腦組織含水量與IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA含量及細胞凋亡均呈明顯正相關(guān),與SOD活性呈明顯負相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：1.自體血注入法制作ICH模型操作簡單,重復性好,且與人ICH病理生理變化基本一致。2. ICH大鼠有明顯神經(jīng)功能損害、腦組織水腫及病理損害。3.實驗大鼠ICH后,血腫周圍出現(xiàn)炎