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1、目的:探討山楂酸對(duì)大鼠大腦皮層神經(jīng)元氧糖剝奪(Oxygen and Glucose Deprivation,OGD)損傷的保護(hù)作用。
方法:用孕15-17天Sprague-Dawley大鼠胎鼠皮層神經(jīng)元,原代培養(yǎng)第5天時(shí)用Tuj1進(jìn)行染色鑒定,第6天時(shí)將培養(yǎng)液分別換為高糖和不含糖DMEM,前者置入CO2培養(yǎng)箱中,后者置入缺氧裝置(5% CO2+95%N2)內(nèi)分別處理0、3、6、9h構(gòu)建OGD模型;用LDH漏出率檢測(cè)細(xì)胞損傷
2、程度、MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)合兩者選擇處理的適宜時(shí)間點(diǎn),在此時(shí)間點(diǎn)給予終濃度梯度為0.1、1、10μM的山楂酸處理,以LDH漏出率作為細(xì)胞損傷指標(biāo)和MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞活力,確定山楂酸對(duì)大鼠皮層神經(jīng)元OGD損傷的保護(hù)作用,以Western Blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bax的表達(dá)。
結(jié)果:成功構(gòu)建了OGD模型,其適宜處理的時(shí)間點(diǎn)是6h。OGD組的LDH漏出率隨山楂酸濃度增加(0.1、1、10μM)而降低;與不加山楂酸的O
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