1、目前，宮頸癌是僅次于乳腺癌的最常見的婦科惡性腫瘤，進一步研究宮頸癌的進展機制，探討其可能的新的治療方向是十分必要的。
　　前期研究中對廣泛性子宮切除術(shù)后子宮主韌帶、骶韌帶及陰道旁組織復合體分別進行了組織結(jié)構(gòu)的定性定量研究，其中包括對神經(jīng)的定性及定量對比研究，這為本研究提供了一定的實驗經(jīng)驗及技術(shù)基礎(chǔ)。本研究分為三部分進行，具體如下:
　　第一部分:宮頸癌灶組織結(jié)構(gòu)的精細定性研究
　　本研究首先對宮頸癌灶中基本組織結(jié)構(gòu)進行

2、定性分析，包括固有結(jié)締組織、脈管組織及神經(jīng)纖維。
　　目的:研究宮頸癌灶的組織結(jié)構(gòu)，了解宮頸癌灶的組織成分。
　　方法:選取2014年6-10月在南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院行宮頸活檢及廣泛性子宮切除術(shù)后的新鮮宮頸癌灶標本33例，每塊標本經(jīng)10％福爾馬林固定、常規(guī)石蠟包埋、切片后分別采用HE染色、特殊染色及多種免疫組織化學染色對宮頸癌灶進行定性研究。
　　對神經(jīng)纖維的研究中我們以神經(jīng)特異性抗體S-100標記總神經(jīng)，檢測宮頸癌灶

3、中是否存在神經(jīng)纖維，進一步對神經(jīng)纖維的性質(zhì)和種類進行研究，分別以生長相關(guān)蛋白GAP-43抗體檢測新生神經(jīng)，以髓鞘特殊染色檢測自主神經(jīng)，并對自主神經(jīng)進行交感及副交感神經(jīng)（分別用酪氨酸羥化酶TH抗體、腸血管活性多肽VIP抗體標記）的檢測分析。
　　結(jié)果:1、宮頸癌灶中常見組織染色結(jié)果
　　1.1 HE染色結(jié)果
　　33例標本中均可見大量不同分化程度的癌細胞，大量的血管組織，包含細小動靜脈及微血管。此外，癌間質(zhì)中尚可見豐富纖

4、維結(jié)締組織，包繞癌巢。33例標本中未能清晰辨認淋巴管及神經(jīng)纖維等組織結(jié)構(gòu)。
　　1.2 固有結(jié)締組織染色結(jié)果
　　改良的Masson三色染色法顯示33例癌灶中均含有豐富的染色為深綠色膠原纖維，膠原纖維圍繞癌巢，分布在癌間質(zhì)中。未見染色為鮮紅色的平滑肌纖維。
　　醛品紅染色法顯示33例癌灶中均含有染色為深紫色的彈力纖維，彈力纖維圍繞癌巢，分布在癌間質(zhì)中，其中大部分深紫色彈力纖維在動脈上顯色。
　　2、神經(jīng)纖維染色結(jié)

5、果
　　2.1 總神經(jīng)染色
　　特異性標記神經(jīng)的S-100抗體免疫組化染色顯示宮頸癌灶中總神經(jīng)染色陽性的有14例，陰性的有19例，總神經(jīng)陽性率為42.42％(14/33)。神經(jīng)纖維分布在癌間質(zhì)中。
　　2.2 新生神經(jīng)染色
　　特異性標記新生神經(jīng)的GAP-43抗體染色法顯示宮頸癌灶中新生神經(jīng)染色陽性的有11例，陽性率為33.33％(11/33)。新生神經(jīng)分布在癌間質(zhì)中，其所占神經(jīng)陽性數(shù)比例為78.57％(11/1

6、4)。
　　結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌灶中除大量癌細胞外，尚有膠原纖維、彈力纖維、血管及淋巴管等常見組織結(jié)構(gòu)，未見平滑肌纖維。此外還發(fā)現(xiàn)部分宮頸癌灶中存在神經(jīng)纖維，且在神經(jīng)的性質(zhì)上，神經(jīng)纖維以新生神經(jīng)為主;在神經(jīng)的種類上，均為無髓鞘神經(jīng)，其中以自主神經(jīng)為主，交感神經(jīng)高于副交感神經(jīng)。
　　第二部分:宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織中神經(jīng)纖維分布的對比研究
　　目的:比較宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織中神經(jīng)

7、纖維的分布情況，探討宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布種類。
　　方法:收集南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院行廣泛性子宮切除術(shù)后的新鮮宮頸癌灶對側(cè)宮頸組織標本11例，因“子宮肌瘤”、“子宮腺肌病”行全子宮切除術(shù)后新鮮宮頸標本21例，所有標本均經(jīng)組織病理學檢測為無癌及無癌前病變的宮頸組織。第一部分實驗的33例宮頸癌灶標本也納入本次研究，共收集65例標本。
　　將完成染色的玻片置于顯微鏡系統(tǒng)進行圖片拍攝并分析，分別記錄宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常

8、宮頸玻片中S-100、GAP-43、TH及VIP染色陽性的例數(shù)。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行分析，以P＜0.05認為差異具有統(tǒng)計學意義。三組間神經(jīng)纖維陽性率的比較采用R×C表資料的卡方檢驗進行統(tǒng)計分析。
　　結(jié)果:1、三組間神經(jīng)纖維的染色結(jié)果
　　(1)三組間總神經(jīng)的分布結(jié)果
　　宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織間總神經(jīng)陽性率分別為42.42％、72.73％、76.19％。三組間總神經(jīng)分布具有顯著差異(x2

9、=7.135，P=0.028)，其中宮頸癌灶中總神經(jīng)的陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。
　　(2)三組間新生神經(jīng)的分布結(jié)果
　　宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織間新生神經(jīng)陽性率分別為33.33％、9.09％、4.76％。三組間新生神經(jīng)分布具有顯著差異(x2=7.532，P=0.023)，其中宮頸癌灶中新生神經(jīng)的陽性率高于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。
　　2、三組間新生神經(jīng)及自主神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比

10、例分布結(jié)果
　　三組間新生神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例分布結(jié)果
　　宮頸癌灶、癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織三組間新生神經(jīng)占其總神經(jīng)陽性的比例分別為78.57％、12.5％、6.25％。三組間新生神經(jīng)占其總神經(jīng)陽性的比例分布具有顯著差異(x2=19.474，P=0.000)，其中宮頸癌灶中新生神經(jīng)占總神經(jīng)陽性的比例高于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織。
　　結(jié)論:宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布種類:
　　(1)宮頸癌灶中總神經(jīng)

11、的陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織，然而其中新生神經(jīng)的陽性率明顯高于其余兩組，宮頸癌灶中神經(jīng)纖維主要為新生神經(jīng);
　　(2)宮頸癌灶中交感神經(jīng)陽性率低于癌灶對側(cè)宮頸組織及正常宮頸組織，副交感神經(jīng)陽性率無明顯差異，然而三組間均以自主神經(jīng)為主，且交感及副交感神經(jīng)分布的比例是相同的，交感神經(jīng)均高于副交感神經(jīng)。
　　第三部分:宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與臨床病理參數(shù)關(guān)系的研究
　　目的:探討宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布與臨床病理參

12、數(shù)之間的關(guān)系。
　　方法:收集前期實驗行宮頸活檢術(shù)/廣泛性子宮切除術(shù)后31例ⅠA期-ⅡA期宮頸癌灶標本，安徽省立醫(yī)院行全子宮切除術(shù)/廣泛性子宮切除術(shù)后ⅠA期-ⅡA期宮頸癌灶已包埋蠟塊組織108例，共139例。所有蠟塊組織經(jīng)連續(xù)切片后分別用神經(jīng)特異性抗體S-100、新生神經(jīng)特異性抗體GAP-43、自主神經(jīng)（交感神經(jīng)特異性抗體TH、副交感神經(jīng)特異性抗體VIP）進行免疫組織化學染色，將完成染色的玻片置于顯微鏡系統(tǒng)進行圖片拍攝并分析。采用

13、獨立樣本t檢測分析宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與患者年齡之間的關(guān)系，采用R×C表資料的卡方檢驗分析宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與其余各臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，采用二分類Logistic回歸分析宮頸癌灶中神經(jīng)纖維與臨床病理參數(shù)的相關(guān)關(guān)系。
　　結(jié)果:1、神經(jīng)纖維染色結(jié)果
　　139例宮頸癌標本中總神經(jīng)染色陽性共有80例，陽性率為57.55％(80/139);新生神經(jīng)染色陽性共有48例，陽性率為34.53％(48/139);自主神經(jīng)中交感神經(jīng)染色陽

14、性共有46例，副交感神經(jīng)染色陽性共有18例，其中交感及副交感神經(jīng)均染色陽性有11例，交感神經(jīng)陽性率為33.09％(46/139)，副交感神經(jīng)陽性率為12.95％(18/139)。
　　2、宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　2.1 宮頸癌灶中總神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　年齡與宮頸癌灶中總神經(jīng)的分布具有顯著差異(t=2.713，P=0.008)，其中總神經(jīng)陽性頸癌灶組患者的平均年齡低于總神經(jīng)陰性組

15、。
　　2.2 宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布與患者的年齡無明顯差異(t=0.588，P=0.558)。
　　宮頸癌灶中新生神經(jīng)的分布與其分期、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無顯著相關(guān)性，其P值分別為0.163、0.673、0.308、0.565、0.771、0.539。
　　2.3 宮頸癌灶中自主神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　2

16、.3.1 宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　年齡與宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布具有顯著差異(t=2.432，P=0.016)，其中交感神經(jīng)陽性的宮頸癌灶組中患者平均年齡小于交感神經(jīng)陰性組。
　　二分類Logistic回歸分析方結(jié)果表明分期對宮頸癌灶中交感神經(jīng)的分布具有相關(guān)性，且分期為危險因素，分期越高宮頸癌灶中交感神經(jīng)陽性率越高(B=0.606，P=0.014);而年齡、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小

17、及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均對宮頸癌灶的交感神經(jīng)分布無顯著相關(guān)性。
　　2.3.2 宮頸癌灶中副交感神經(jīng)的分布與臨床病理參數(shù)的關(guān)系
　　二分類Logistic回歸分析結(jié)果表明分期對宮頸癌灶中副交感神經(jīng)的分布具有相關(guān)性，且分期為危險因素，分期越高宮頸癌灶中副交感神經(jīng)陽性率越高(B=0.710，P=0.020);而年齡、分化程度、病理類型、癌灶大體類型、癌灶大小及盆腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均對宮頸癌灶的副交感神經(jīng)分布無顯著相關(guān)性。
　　結(jié)論:宮

18、頸癌灶中神經(jīng)纖維與臨床病理參數(shù)的關(guān)系:
　　(1)神經(jīng)纖維在年輕宮頸癌患者中分布陽性率較高，以交感神經(jīng)為主，而與副交感神經(jīng)及新生神經(jīng)不相關(guān);
　　(2)神經(jīng)纖維在宮頸鱗癌中分布陽性率較高，且以交感神經(jīng)為主，而與副交感神經(jīng)及新生神經(jīng)不相關(guān);
　　(3)臨床分期分別是宮頸癌灶中新生神經(jīng)、交感神經(jīng)及副交感神經(jīng)分布的影響因素，其中分期越高，其神經(jīng)陽性率可能越高;
　　(4)宮頸癌灶中神經(jīng)纖維的分布與分化程度、癌灶大體類型