1、背景：周圍神經(jīng)缺損損傷在外科創(chuàng)傷中較為常見，其修復(fù)和功能重建一直是臨床上面臨的一大難題。在周圍神經(jīng)缺損損傷治療中較為經(jīng)典的方法是自體神經(jīng)移植，盡管結(jié)果較為理想，但會造成供體神經(jīng)區(qū)域的功能缺失，所以在臨床上無法推廣。因此，尋找新的神經(jīng)來源來代替自體神經(jīng)引起了較多關(guān)注。近年來，組織工程的發(fā)展為我們提供了新的方法。許旺細胞（SCs）是周圍神經(jīng)主要的功能細胞，但是自體來源的SCs在取材方面較為困難，且在體外培養(yǎng)方面也存在困難,異體來源的SCs則

2、存在免疫排斥反應(yīng)的問題，這些都限制了它們在臨床上的應(yīng)用。人臍血間充質(zhì)干細胞(Human Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells,HUCBMSCs)在分離、培養(yǎng)、擴增等環(huán)節(jié)的成功,以及成功的誘導(dǎo)分化為類SCs,為組織工程修復(fù)周圍神經(jīng)缺損損傷的種子細胞提供了一種新的選擇。
　　目的：評價將HUCBMSCs來源的類SCs作為種子細胞，修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)15㎜缺損損傷的效果，為HUCBMSCs

3、在臨床上治療周圍神經(jīng)損傷提供必要的實驗依據(jù)。
　　方法：⑴無菌條件下，收集足月產(chǎn)、正常胎兒的臍帶血，應(yīng)用肝素抗凝，使用6％高分子量羥乙基淀粉沉降紅細胞，后應(yīng)用人淋巴細胞分離液分離出臍血中單個核細胞，再應(yīng)用Mesencult?培養(yǎng)基對分離出的單個核細胞進行培養(yǎng)、純化以及擴增，從而獲得MSCs，并通過流式細胞儀對細胞表型進行鑒定；⑵依次應(yīng)用含β-ME+bFGF、RA、Forskolin+bFGF+PDGF-BB+NGF+Heregul

4、in的誘導(dǎo)液將臍帶血MSCs定向誘導(dǎo)分化為類SCs,并通過免疫細胞化學(xué)法，鑒定誘導(dǎo)后細胞的神經(jīng)膠質(zhì)細胞標志物S100b、GFAP、P75；⑶應(yīng)用-196℃液氮反復(fù)凍融振蕩洗滌的方法對異體神經(jīng)脫細胞處理，制備去細胞坐骨神經(jīng)基膜管，修剪長度為15mm,調(diào)整類SCs密度為1×107/mL后，使用微量注射器將細胞注入去細胞基膜管中，制備成組織工程神經(jīng)；⑷30只SD大鼠隨機分為3組,每組10只,A組:將類SCs復(fù)合去細胞神經(jīng)基膜管后橋接15㎜坐骨

5、神經(jīng)缺損；B組:僅用去細胞神經(jīng)基膜管橋接15㎜神經(jīng)損傷；C組:坐骨神經(jīng)切下15㎜后原位縫合。8周后,進行大鼠大體觀察、坐骨神經(jīng)功能指數(shù)測定、腓腸肌濕重測定、神經(jīng)電生理功能檢測、組織學(xué)染色觀察等檢查對神經(jīng)修復(fù)情況進行評價。
　　結(jié)果：①分離培養(yǎng)出的細胞高表達CD44、CD73，低表達或不表達CD34；②誘導(dǎo)后類SCs幾乎都表達神經(jīng)膠質(zhì)細胞標志物 S100b、GFAP和P75；③通過8周的動物實驗觀察，臍帶血MSCs來源的類SCs復(fù)合