人工I型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的實(shí)驗(yàn)研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、第一部分、人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的動(dòng)物模型的制作
  目的:建立一個(gè)S-D大鼠坐骨神經(jīng)鉗夾傷后神經(jīng)外膜損傷和神經(jīng)纖維部分損傷,之后用人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的模型。損傷分類屬于輕度SeddonⅢ型或SunderlandⅢ-Ⅴ度損傷。
  方法:48只健康成年雄性S-D大鼠按照隨機(jī)表法隨機(jī)分為2組,每組24只,各組編號(hào):Ⅰ組,Ⅱ組。Ⅰ組為實(shí)驗(yàn)組(瘢痕切除神經(jīng)松解后切除神經(jīng)外膜,人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜

2、)、Ⅱ組為對(duì)照組(瘢痕切除神經(jīng)松解后切除神經(jīng)外膜,周圍軟組織進(jìn)行覆蓋)。損傷后大體觀察。測(cè)定坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)。松解前6周測(cè)定肌肉動(dòng)作電位(MAP)的出現(xiàn)率和出現(xiàn)MAP的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MNCV)。
  結(jié)果:
 ?、俅篌w觀察:大鼠均健康存活,無(wú)手術(shù)切口感染。兩組大鼠患肢均在傷后麻醉蘇醒后檢測(cè)顯示立刻癱瘓,后支呈瘸腿狀行走,術(shù)后12天時(shí)患側(cè)足踝關(guān)節(jié)處出現(xiàn)破潰。
 ?、赟FI值為0表示坐骨神經(jīng)功能正常,值為-1

3、00表示坐骨神經(jīng)完全斷裂。所有動(dòng)物損傷前SFI值均接近0,提示功能正常。Ⅰ組:一周末時(shí),SFI:-86.23±6.65,三周末時(shí)SFI.:-39.62±5.27,六周末時(shí)SFI:-30.48±6.49。Ⅱ組:SFI:-85.26±7.27,三周末時(shí)SFI:-41.63±5.11,六周末時(shí)SFI:-29.42±2.34。組間對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說(shuō)明兩組損傷程度相近。
 ?、蹅?周(松解術(shù)中行松解前)肌肉動(dòng)作電位(

4、MAP)的出現(xiàn)率的測(cè)定:Ⅰ組:6周時(shí)7只大鼠出現(xiàn)動(dòng)作電位,17只未出現(xiàn)動(dòng)作電位,出現(xiàn)率29.2%;Ⅱ組:6周時(shí)6只大鼠出現(xiàn)動(dòng)作電位,18只未出現(xiàn)動(dòng)作電位,出現(xiàn)率25.0%。兩組在損傷6周時(shí)MAP出現(xiàn)率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.26,P>0.05)。傷后6周(松解術(shù)中行松解前)出現(xiàn)動(dòng)作電位的例數(shù)測(cè)定運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度:Ⅰ組38.79±6.18m/s;Ⅱ組:39.42±5.28m/s。6周時(shí)MNCV差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

5、>  ④組織學(xué)觀察:Ⅰ組和Ⅱ組光鏡下觀察損傷相近,均可見(jiàn)神經(jīng)外膜破損,外膜和束膜下出血水腫。部分毛細(xì)血管破裂出血。神經(jīng)纖維部分撕裂,之間形成間隙,纖維排列不整齊,部分髓鞘染色變淺。
  結(jié)論:S-D大鼠坐骨神經(jīng)外膜鉗夾損傷的模型在神經(jīng)松解前兩組的損傷程度相近??梢耘懦山庑g(shù)前因?yàn)楦鞣N偏倚產(chǎn)生的誤差。
  第二部分、人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的實(shí)驗(yàn)研究
  目的:觀察人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建損傷段神經(jīng)外膜后神經(jīng)的病

6、理學(xué)變化及功能影響,探討人工Ⅰ型膠原神經(jīng)導(dǎo)管重建神經(jīng)外膜的實(shí)驗(yàn)效果,評(píng)定其對(duì)損傷段神經(jīng)外膜的形態(tài)和神經(jīng)功能恢復(fù)的作用以及神經(jīng)外膜的再生能力。
  方法:48例S-D大鼠左側(cè)坐骨神經(jīng)擠壓損傷神經(jīng)外膜重建模型建立完成,右側(cè)坐骨神經(jīng)作為空白對(duì)照組不做任何處理。損傷6周后S-D大鼠全部存活,除去取材用鼠,采用第一部分的分組,此時(shí)設(shè)定為A組(實(shí)驗(yàn)組)、B組(對(duì)照組),每組20只S-D大鼠,二期手術(shù)兩組均行瘢痕切除,神經(jīng)松解術(shù)。術(shù)后普通喂養(yǎng)9

7、周,分別于術(shù)后第6周記錄各組實(shí)驗(yàn)S-D大鼠的MAP出現(xiàn)率(%)和MNCV(m/s),術(shù)后6周內(nèi)每周末記錄大鼠SFI)。6周時(shí)MRI比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的坐骨神經(jīng)橫徑和前后徑;9周時(shí)觀察患肢坐骨神經(jīng)光鏡和電鏡下髓鞘形成情況和神經(jīng)生長(zhǎng)情況;計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)測(cè)定有髓神經(jīng)纖維和髓鞘生長(zhǎng)情況;髓鞘堿性蛋白(MBP)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的蛋白含量變化差異。之后S-D大鼠實(shí)施安樂(lè)死,檢測(cè)兩組S-D大鼠雙下肢的脛前肌濕重、肌纖維截面積的的差異,判斷肌肉萎縮程

8、度。
  結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組(A組)神經(jīng)外膜大部分已修復(fù),較為平整,與周圍組織無(wú)明顯粘連,神經(jīng)再生較多,直徑增粗,成熟度較高,髓鞘厚度高。患肢神經(jīng)松解前一天、松解后6周坐骨神經(jīng)MNCV均值分別為38.79±6.18m/s、55.19±3.17m/s。對(duì)照組(B組)沒(méi)有形成完整的神經(jīng)外膜,神經(jīng)纖維與周圍組織再次產(chǎn)生粘連,周圍大量膠原纖維增生,神經(jīng)再生稀疏,排列雜亂,成熟度較低,髓鞘厚度低。患肢神經(jīng)松解前一天、松解后6周坐骨神經(jīng)MNCV均值

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