1、冬蟲(chóng)夏草是著名的傳統(tǒng)中藥和保健品，從17世紀(jì)開(kāi)始就作為一種滋補(bǔ)藥在東西方國(guó)家得到廣泛應(yīng)用。蛹蟲(chóng)草作為我國(guó)傳統(tǒng)的民間藥食兩用真菌，由于其活性成分和藥理作用與冬蟲(chóng)夏草相似，因此具有很高的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。但生長(zhǎng)條件的特殊性決定了蛹蟲(chóng)草野生資源稀少，再加上人們的過(guò)度采挖，造成了野生蛹蟲(chóng)草資源短缺、價(jià)格昂貴，不能滿足巨大的市場(chǎng)需求。因而，探討蛹蟲(chóng)草的高效人工培養(yǎng)方式成為藥用真菌研究領(lǐng)域的一大熱點(diǎn)。 該論文在本實(shí)驗(yàn)室原有研究的基礎(chǔ)上對(duì)蛹蟲(chóng)草C

2、ordyceps militaris Link．的鑒定、性質(zhì)及人工培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。根據(jù)供試菌株菌絲的顯微結(jié)構(gòu)、子實(shí)體形態(tài)特征并結(jié)合ITS序列明確了其分類地位；以胞外多糖和蟲(chóng)草素為考察指標(biāo)，對(duì)該菌的液體發(fā)酵條件(營(yíng)養(yǎng)因素、環(huán)境因子)進(jìn)行了優(yōu)化；此外，還對(duì)蛹蟲(chóng)草的雙向固體發(fā)酵進(jìn)行了初步探討。 通過(guò)觀察蛹蟲(chóng)草菌絲和子實(shí)體的顯微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)野生和人工培養(yǎng)的蛹蟲(chóng)草子實(shí)體在外觀形態(tài)上差別較大；菌絲為有隔菌絲，在菌絲體頂端可形成分生孢子梗，

3、孢子梗頂端不膨大，無(wú)分枝，分生孢子呈球狀或橢圓狀，成串地著生于孢子梗上，這些特征與青霉極為相似；蛹蟲(chóng)草子囊殼呈瓶狀，子囊線形、細(xì)長(zhǎng)，平行排列在子囊殼內(nèi)；每個(gè)子囊內(nèi)有8個(gè)子囊孢子，子囊孢子有隔膜若干，具有擬青霉型產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)。同時(shí)，ITS序列分析結(jié)果表明，該菌株與蛹草擬青霉對(duì)應(yīng)序列的相似度達(dá)到了99％。 菌絲固體培養(yǎng)研究結(jié)果表明，蛹蟲(chóng)草菌絲在培養(yǎng)時(shí)最適的碳源、氮源分別是乳糖(或葡萄糖)和蛋白胨，在pH7.0～8.0、溫度28℃、黑暗的

4、環(huán)境條件下最適宜菌絲的生長(zhǎng)。在搖瓶培養(yǎng)中，以菌絲體生物量和胞外多糖產(chǎn)量為目標(biāo)產(chǎn)物，應(yīng)用正交實(shí)驗(yàn)確定蛹蟲(chóng)草液體發(fā)酵終點(diǎn)為7天，最優(yōu)碳源、氮源分別為葡萄糖和蛋白胨，蛹蟲(chóng)革菌絲體最適宜在中性營(yíng)養(yǎng)液中生長(zhǎng)，而且當(dāng)溫度為28℃左右時(shí)長(zhǎng)勢(shì)最好。此外，在液體發(fā)酵中重點(diǎn)考察了添加銨根離子對(duì)蟲(chóng)草素含量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)銨根離子能夠顯著增加蟲(chóng)草素的含量。 最后，首次對(duì)蛹蟲(chóng)草的雙向固體發(fā)酵進(jìn)行了初步探討，在固體培養(yǎng)基中添加了六種不同類型藥材的提取液，結(jié)