肝特異性LASS2基因敲除小鼠肝細胞結(jié)構和功能的改變及對TNFAIP3-NF-kB通路的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、LASS2(homosapiens longevity assurance homologue2)基因是人和小鼠的長壽保障基因LASS家族成員。人和小鼠的LASS基因及產(chǎn)物有高度同源性。在LASS2基因功能的前期研究中,我們發(fā)現(xiàn)LASS2有抑制肝癌的作用。本研究主要內(nèi)容是比較幼年LASS2肝特異敲除小鼠和野生小鼠肝組織形態(tài)功能的差異及腫瘤壞死因子α誘導蛋白3基因(tumor necrosis factor alpha-induced p

2、rotein3,TNFAIP3)/NF-kB(P50)在兩組小鼠中的差異表達,以闡明LASS2的生物學功能。
  目的:
  探討LASS2基因敲除后小鼠肝組織結(jié)構及功能的改變及相關基因的改變,為詳細闡明LASS2基因在小鼠肝組織中的生物學功能奠定基礎。
  方法:
  將4周齡雄性C57BL6小鼠分為LASS2基因敲除組(LAS S2 KO)和野生型(WT)組,每組5只。小鼠脊椎脫臼法處死,稱體重、肝重等。取小

3、鼠眼球血標本檢測谷草轉(zhuǎn)氨酶(Aspartate transaminase,AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenase,LDH)。小鼠肝組織,部分固定于AAF(Alcohol,Acetic Acid,F(xiàn)ormalin)液,制作石蠟切片、HE染色和增殖細胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen,PCNA)染色;

4、另一部分肝組織用于提取總蛋白和總RNA,進行基因芯片分析,對白蛋白(Albumin,ALB)、甲胎蛋白(Alpha fetoprotein,AFP)、TNFAIP3、NF-kB(P50)的表達水平進行qPCR及western blot檢測。
  結(jié)果:
  LASS2 KO小鼠肝/體重比升高。肝功能檢測結(jié)果顯示AST、ALT、LDH均不同程度上調(diào)。qPCR和western blot分析顯示ALB、AFP表達均顯著下調(diào)。HE染

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